Verticillium - Toubkal

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- Coloration : le gel est trempé dans la solution de coloration (bleu de
Coomassie R 250 (1.15g- éthanol 250ml- acide acétique 40ml- eau distillée 710ml).
Laisser le gel 10 minutes à 60°C ou 1h à 1h.30 à température ambiante.
- Rinçage : 5 minutes dans la solution de décoloration usée
- Décoloration : 3 bains successifs de 2heures dans la solution de
décoloration. La décoloration est arrêtée lorsque le fond du gel n’est pratiquement
plus bleu.
- Conservation : tremper dans la solution de conservation (éthanol 100mlacide
acétique 40ml- glycérol 100ml- eau distillée 760ml). Laisser sécher à l’abri
de la poussière. Pour conserver le gel pour une longue durée, le mettre entre deux
feuilles en plastique à 4°C.
3.5. Lecture des résultats
Les poids moléculaires des différentes protéines sont déterminés à partir de la
courbe log 10 PM (standard de PM) qui est une fonction de la mobilité
électrophorétique.
B. Résultats
1. Effet de la salinité sur le taux des protéines secrétées dans les
filtrats de culture par Verticillium.
Les résultats du dosage des protéines extracellulaires libérées après trois semaines
par l’isolat P80 dans le milieu de culture additionné de sel sont consignés sur le
tableau 9.
L’analyse des résultats montre que les filtrats bruts issus des cultures enrichies en
sel (2 à 6g/l) renferment plus de protéines que le filtrat brut témoin sans sel.
L’augmentation des quantités de protéines est faible en présence de 2 et 4g/l. Le
taux de protéines le plus important est contenu dans le filtrat à 6g/l de NaCl et qui
montre une augmentation de 102.10% par rapport au filtrat de contrôle.
Cependant l’apport de 8g/l dans le milieu de culture provoque une baisse de la
quantité de protéines extracellulaires par rapport aux autres concentrations de sel.
Néanmoins, le taux de protéines se rapproche de celui du filtrat témoin sans sel.