Verticillium - Toubkal
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de Goicoechea et al., (2000) sur le couple piment-<strong>Verticillium</strong> démontrent que les<br />
taux de proline augmentent dans les feuilles des plantes après infection avec<br />
<strong>Verticillium</strong> dahliae. Ces auteurs supposent que ces substances organiques<br />
peuvent être des détecteurs des dommages causés par l’infection fongique.<br />
A la lumière de ces données, nous avons été incités à suivre l’évolution des taux de<br />
proline chez les tomates à la suite de leur exposition aux stress de la salinité et de<br />
l’infection verticillienne.<br />
2. Matériel et méthodes<br />
La détermination de la proline est réalisée selon la méthode colorimétrique de<br />
Troll et Lindsley (1955) reprise par Magné et Larher, (1992).<br />
2.1. Extraction<br />
Les échantillons de feuilles (150mg environ) prélevées près de l’apex subissent une<br />
extraction alcoolique dans 3 ml de méthanol placé dans un tube à hémolyse.<br />
L’ensemble est placé dans un bain-marie à 90°C pendant une heure. Les tubes où<br />
se fait l’extraction doivent être bien fermés pour éviter l’évaporation du méthanol.<br />
2.2. Dosage<br />
Après refroidissement, à 1 ml de l’extrait sont ajoutés 2 ml d’une solution de<br />
ninhydrine à 1% dans l’acide acétique glacial :eau (60 :40 V/V) et l’ensemble est<br />
mis au bain-marie à 100°C pendant une heure. Après refroidissement, 5 ml de<br />
toluène sont ajoutés et le mélange est agité vigoureusement. Le chromatophore<br />
formé est stable pendant 24 heures. Pour la lecture de l’absorbance, on prélève la<br />
phase supérieure après 30 minutes de repos. La densité optique est lue à 520nm.<br />
Les résultats sont référés à une courbe étalon effectuée à partir de quantités<br />
croissantes d’une solution de proline à 1µg/ml. Les résultats sont exprimés en µg/g<br />
.MF. Trois répétitions sont prévues par traitement salin pour les plantes saines et<br />
les plantes infectées.