DETERMINATION DE LA TENEUR EN CELLULOSE BRUTE ... - Favv

Agence fédérale
pour la Sécurité
de la Chaîne alimentaire
Laboratoires de Liège
MET-LFSAL-002
I-MET
DETERMINATION DE LA TENEUR EN CELLULOSE
BRUTE DANS LES ALIMENTS POUR ANIMAUX
Version 06
Date d’application 2012-02-06
Rédaction par : Ing Marianne Aubry, Responsable technique ; 2012-01-30
Révision par : Ing Marianne Aubry, QAM ; 2012-02-02
Autorisation de publication par :
ir. Patrick Genot, Manager du LFSAL
Gestion et localisation de la
version valide :
Serveur du laboratoire de Liège
Destinataires :
Collaborateurs de la section Chimie Humide
Mots clefs :
Cellulose, aliment, animaux
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DET. DE LA TENEUR EN CELLULOSE BRUTE DANS LES ALIMENTS POUR ANIMAUX
Aperçu des modifications *
Révision
par/date*
EVRARD M /
05/08/2004
Aubry -
03/02/2009
Aubry –
2012/02/XX
Motif de la révision
Précisions
Adaptation template et référence LIMS
Adaptation suite à l’audit interne
Partie du texte/portée
de la révision
Tout
tout
Expression du résultat
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TABLE DES MATIERES
1 OBJECTIF .......................................................................................................................... 4
2 CHAMP D’APPLICATION ................................................................................................. 4
3 DOCUMENTS LEGAUX ET NORMATIFS ........................................................................ 4
4 DEFINITIONS ET ABREVIATIONS ................................................................................... 4
5 PRINCIPE ........................................................................................................................... 4
6 INDICE DE PRESTATION ................................................................................................. 4
6.1 REPETABILITE ............................................................................................................................. 4
6.2 REPRODUCTIBILITE ..................................................................................................................... 5
7 CONSIGNES DE SECURITE ET MESURES SPECIFIQUES ........................................... 5
8 REACTIFS .......................................................................................................................... 5
9 APPAREILS ....................................................................................................................... 5
10 PREPARATION DES ECHANTILLONS ........................................................................... 6
11 METHODE .......................................................................................................................... 6
11.1 PRISE D’ESSAI ........................................................................................................................ 6
11.2 ELIMINATION DU CARBONATE ................................................................................................ 6
11.3 DEGRAISSAGE ........................................................................................................................ 6
11.4 DIGESTION ACIDE :................................................................................................................. 6
11.5 PREMIERE FILTRATION ........................................................................................................... 6
11.6 DEGRAISSAGE ........................................................................................................................ 6
11.7 DIGESTION ALCALINE ............................................................................................................. 7
11.8 DEUXIEME FILTRATION .......................................................................................................... 7
11.9 SECHAGE ................................................................................................................................ 7
11.10 INCINERATION ........................................................................................................................ 7
11.11 DETERMINATION DU BLANC ................................................................................................... 7
12 CONTROLE DE LA QUALITE ........................................................................................... 7
13 CALCUL ET RAPPORTAGE ............................................................................................. 7
14 REFERENCE AUX PROCEDURES, INSTRUCTIONS, DOCUMENTS, FORMULAIRES
OU LISTES Y AFFERENTS ...................................................................................................... 8
14.1 PROCEDURES .......................................................................................................................... 8
14.2 LISTES .................................................................................................................................... 8
14.3 FORMULAIRES ........................................................................................................................ 8
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1 Objectif
Dosage de cellulose brute dans les aliments des animaux
2 Champ d’application
La méthode permet de doser, dans les aliments des animaux, les matières organiques
exemptes de graisses et insolubles en milieu acide et en milieu alcalin, conventionnellement
désignés sous le nom de cellulose brute au-dessus de 10 g/kg.
3 Documents légaux et normatifs
Norme/Fil conducteur
NBN EN ISO 6865 : 2000
Règlement 939/2010/CE
Clauses
Dérivé de la norme :
- Le principe de base suit la norme cependant la
méthode a été adaptée à l’automatisation par le
Fibertec,
- La perte en masse du blanc admis est de 4 mg (2 mg
dans la norme)
Partie A (Tolérances)
4 Définitions et abréviations
Terme Origine de la définition Définition
Pas applicable
Abréviation Origine Signification
Pas applicable
5 Principe
L’échantillon est éventuellement décarbonaté, dégraissé et traité successivement par des
solutions bouillantes d’acide sulfurique et d’hydroxyde de potassium de concentrations
déterminées. Le résidu est séparé par filtration sur un filtre en verre, lavé, séché, pesé puis
calciné à 500C. La perte de poids résultant de la calcination correspond à la cellulose brute
présente dans l’échantillon d’essai.
6 Indice de prestation
6.1 Répétabilité
La différence en valeur absolue entre deux résultats de test simples indépendants, obtenus
en employant la même méthode sur un matériau test identique dans le même laboratoire par
le même opérateur se servant du même équipement dans un court intervalle de temps, ne
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dépassera pas dans plus de 5% des cas la limite de répétabilité (r) mentionnée dans la
Table 1.
6.2 Reproductibilité
La différence en valeur absolue entre deux simples résultats de test, obtenus en utilisant la
même méthode sur un matériau de test identique dans plusieurs laboratoires par des
opérateurs différents qui utilisent un équipement différent, ne dépassera pas dans plus de 5%
des cas la reproductibilité limite (R) mentionnée dans la Table 1.
Sample
Sunflower seed meal
Palm kernel expellers
Cattle feed (pelleted)
Corn gluten feed
Tapioca
Dog food
Cat food
Crude fibre content
g/kg
223,3
190,3
115,8
73,3
60,2
30,0
22,8
r
g/kg
8,4
19,4
5,3
5,8
5,6
3,2
2,7
R
g/kg
16,1
42,5
13,8
9,1
8,8
8,9
6,4
Table 1 – Reapeatability limit (r) and reproducibility limit (R)
7 Consignes de sécurité et mesures spécifiques
- Suivre les instructions de sécurité spécifiées sur les fiches de sécurité des réactifs et
dans le log book de l'appareil.
- Toutes les manipulations de solvants se font sous hotte.
8 Réactifs
- Eau déminéralisée (R144)
- HCl 0,5 M D006 (pour un litre : 50 ml de HCl R013 + 950 ml d’eau R144)
- Acide sulfurique 0,13 mol/l (R438)
- Solution d’hydroxyde de potassium 0,23 mol/l (R443)
- Acétone (R0076)
- Adjuvant de filtration (Célite 545 ou équivalent) (R010)
- Antimousse (n-octanol) (R009)
- Ether de pétrole (point d’ébullition 40-60°C) (R012)
9 Appareils
- Balance analytique à 0,1 mg de précision
- Creusets filtrants en verre robuste de 50 ml, avec un filtre en verre fritté de porosité 40-
100 µm. Avant la première utilisation, chauffer prudemment et graduellement le
nouveau creuset filtrant pendant quelques minutes à 500°C. Refroidir.
- Capsules d’incinération (en quartz).
- Etuve électrique chauffée et ventilée, capable de maintenir une température de 130°C.
- Dessiccateur contenant du silicagel.
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- Four à moufle à 500°C.
- Système d’extraction à froid FOSS Fibertec System 1021.
- Système d'extraction à chaud pour la digestion acide et alcaline (FOSS Fibertec 2010)
10 Méthode
10.1 Préparation des échantillons
L’échantillon est préparé suivant les directives de la procédure « LAB23 P011 Préparation
des échantillons »
10.2 Prise d’essai
Peser à 0,1 mg près 1 g de l’échantillon préparé (m 1 ). Transférer cette quantité au creuset
filtrant et ajouter 2 g de Celite (R010).
10.3 Elimination du carbonate
A effectuer uniquement dans le cas où il y aurait plus de 50 g/kg de carbonate exprimé
en carbonate de calcium.
Connecter le creuset filtrant au système de chauffage. Laver l’échantillon 3 fois avec 30 ml
d’acide chlorhydrique (D006) chaque fois. Après chaque addition, laisser agir une minute
avant de filtrer. Laver une fois avec 30 ml d’eau (R144).
10.4 Dégraissage
Connecter le creuset filtrant au système d’extraction à froid et laver l’échantillon 3 fois sous
vide avec 30 ml d’éther de pétrole (R012) chaque fois. Sécher le résidu par succion après
chaque lavage.
10.5 Digestion acide :
Connecter le cylindre d’ébullition au creuset filtrant. Ajouter quelques gouttes d’anti-mousse
(R009) et transférer dans le cylindre 150 ml d’acide sulfurique bouillant (R438). Amener à
ébullition en et bouillir vivement pendant 30 minutes.
10.6 Première filtration
Couper le chauffage. Positionner la vanne vers le tuyau de vidange et, sous vide, filtrer l’acide
sulfurique (R438) à travers le creuset filtrant et laver le résidu 3 fois avec 30 ml d’eau chaude
(R144). Filtrer le résidu par succion après chaque lavage. S’il y a problème de filtration,
refouler de l’air prudemment en sens inverse pour débloquer le filtre.
Remarques
Si la filtration avec les solutions acide et basique est difficile, utiliser l’air comprimé par le
tuyau de vidange de l’unité de chauffage et continuer la filtration.
10.7 Dégraissage
Connecter le creuset filtrant au système d’extraction à froid et laver le résidu sous vide avec 3
fois 30 ml d’acétone chaque fois (R076). Tout de suite après, laver le résidu 3 fois sous vide
avec 30 ml d’éther de pétrole (R012) chaque fois. Sécher le résidu par succion après chaque
lavage.
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10.8 Digestion alcaline
Connecter le cylindre d’ébullition au creuset filtrant et rincer avec 30 ml d’eau chaude. Fermer
la vanne de vidange. Ajouter quelques gouttes d’anti-mousse (R009). Transférer 150 ml de
solution d’hydroxyde de potassium bouillant (R443) dans le cylindre connecté au creuset
filtrant. Porter rapidement à ébullition et bouillir vigoureusement pendant 30 minutes.
10.9 Deuxième filtration
Couper le chauffage. Ouvrir la vanne du tuyau de décharge et filtrer la solution d’hydroxyde
de potassium (R443) sous vide à travers le creuset filtrant. Laver le résidu avec 3 fois 30 ml
d’eau chaude (R144) chaque fois. Sécher le résidu par succion, après chaque lavage. Laisser
refroidir 5 minutes. S’il y a problème de filtration, refouler de l’air prudemment en sens inverse
pour débloquer le filtre. Connecter le creuset filtrant au système d’extraction à froid et laver
l’échantillon 3 fois sous vide avec 30 ml d’acétone (R011). Sécher le résidu par succion après
chaque lavage.
10.10 Séchage
Pendant l’incinération ou le refroidissement, des parties de la plaque de filtre sertie du
creuset, peuvent se décoller. Comme cela peut causer un résultat d’analyse incorrect, placer
le creuset filtrant dans une capsule d’incinération. Sécher la capsule avec son contenu
pendant au moins 2 heures dans l’étuve à 130°C. Laisser le creuset filtrant et la capsule
d’incinération refroidir en dessiccateur. Immédiatement après l’avoir retiré du dessiccateur,
peser le creuset filtrant et la capsule d’incinération à 0,1 mg près (m 2 ).
10.11 Incinération
Placer le creuset filtrant et la capsule d’incinération dans le four à moufle froid, monter à
500°C et incinérer son contenu pendant deux heures. Retirer le creuset filtrant et la capsule
d’incinération et laisser refroidir. Quand ils ne sont plus que légèrement chauds, les placer
dans le dessiccateur. Refroidir complètement et peser à 0,1 mg près (m 3 ).-…………………
10.12 Détermination du blanc
Effectuer un essai à blanc sans l’échantillon sur 2 g de Célite 545. La perte de poids résultant
de la minéralisation ne doit pas excéder 4 mg (m 0 ) (norme ISO 6865 : 2 mg).
11 Contrôle de la qualité
L’analyse est suivie par une carte de contrôle de type Shewhart. Tout écart de la carte doit
être signalé au responsable technique ou à son remplaçant qui décidera des actions
correctives à prendre.
12 Calcul et rapportage
Calculer la teneur en cellulose brute de l’échantillon par l’équation :
= − + 100
avec m 1 , m 2 , m 3 en grammes.
- m 0 : différence de masse de l’essai à blanc
- m 1 : prise d’essai de l’échantillon (g)
- m 2 : peser du creuset filtrant et de la capsule d’incinération après le dernier séchage
(§10.9) (g)
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- m 3 : peser du creuset filtrant et de la capsule d’incinération après incinération
(§10.10) (g)
L’incertitude de mesure sur l’analyse est reprise dans la liste L010-01 : Liste des incertitudes
de mesure section Chimie humide –Aliment
13 Référence aux procédures, instructions, documents, formulaires ou
listes y afférents
13.1 Procédures
LAB23 P018 : Création et suivi des cartes de contrôle qualité
13.2 Listes
LAB23 L010-01: Liste des incertitudes de mesure section Chimie humide - Aliments
13.3 Formulaires
LAB 23 F543 : Rapport d’essai
F543-CH01 Feuille de travail chimie humide
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