Laboratoire de recherche en virologie médicale - Institut Louis ...

3- Axe 3 : Relations Virus de la dengue/Hôte humain
Ligands peptidiques altérés et immuno-pathogenèse de la dengue
• Participants et collaborateurs
C. ROCHE, R. TEYSSOU, I. CAZALENS (CIE), A. BELLEOUD (CIE), V. MOU (CIE),
J. LEININGER (Cellule prévention santé – Raiatea), A. IMRIE (Université d’Hawaii)
• Objectif
Ce programme a pour objectif la caractérisation de la réponse cellulaire T mémoire
anti-dengue vis-à-vis de sérotypes hétérologues, par l’étude in vitro des réponses
cellulaires T (cytolyse et profil cytokinique) de patients dont l’historique de dengue est
connu, en présence de peptides NS5 de sérotype homo- ou hétérologues.
• Etude
L’intérêt de développer cette étude en Polynésie française réside en l’absence connue
de co-circulation des différents sérotypes de dengue permettant l’étude des réponses
immunitaires consécutives à une infection d’un seul sérotype de virus de dengue, sans
que cet effet soit masqué par une infection endémique par les 4 sérotypes.
Dans ce contexte, chez des personnes dont la chronologie des infections par la dengue
en Polynésie française est connue, l’objectif de l’étude est de mesurer la réactivité des
lymphocytes T après stimulation avec des antigènes de virus de dengue hétérologues et
déterminer le profil de cytokines produites par les lymphocytes T spécifiques des virus
de dengue par des méthodes incluant ELISpot, relargage de 51 Cr, et marquage
intracellulaire de cytokines.
La sélection des personnes à inclure, les prélèvements (100 ml de sang hépariné),
l’isolement et la congélation des PBMC seront réalisés à l’ILM. Les cellules seront
ensuite expédiées en bonbonne d’azote liquide à l’Université de Hawaii où seront
réalisés l’ELISPOT pour mesurer la réponse IFNγ à une stimulation par des peptides
viraux, l’établissement de lignées et de clones T, l’immortalisation de lymphocytes B
(étude de cytolyse et typage des molécules CMH présentant les peptides donnant la
meilleure réponse).
• Etat d’avancement des travaux/Résultats
Une sélection d’une vingtaine de personnes ayant eu au moins 2 épisodes de dengue
confirmés par le laboratoire de l’ILM a été effectuée. La plupart de ces personnes ont
pu être contactées soit par le Centre de consultation médicale et d’investigation
épidémiologique (CIE) de l’ILM pour les personnes résidant aux Iles-du-Vent, soit par la
Cellule prévention santé des Iles-sous-le-Vent pour ceux résidant aux Iles-sous-le-Vent.
Les personnes ayant accepté de participer à cette étude feront un don de sang (100 ml
sur tube hépariné) en janvier 2007. Une feuille de consentement rédigée en français et
en tahitien leur sera soumise avant le prélèvement.
Par ailleurs, le séquençage des gènes E et NS5 de 4 souches de DEN2 (1996/1997) a été
réalisé de façon à identifier les peptides spécifiques des souches de dengue 2 ayant
circulé en Polynésie française.
• Conclusions et perspectives
Ce programme se poursuivra dès le début de l’année 2007 avec le recueil et le
traitement des prélèvements.
4- Axe 4 : Relations Virus de la dengue/Moustique vecteur
Protéines se liant au virus de la dengue dans les extraits de cellules cibles et de glandes salivaires de
moustiques vecteurs
• Participants et collaborateurs
V.M. CAO-LORMEAU, C. HERBAUT (Université de Polynésie française)
Institut Louis Malardé – Rapport annuel 2006 38