Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...

sensibilité aux esters de phorbol, puissants activateurs des PKCs. Par contre, la partie N-
terminale de PLD2 semble nécessaire à son activité basale. Une délétion dans cette région
conduit à une enzyme de faible activité basale qui devient sensible à l’activation par ARF.
La région C-terminale est relativement bien conservée entre les PLD (Xie et al., 2000).
Contrairement à la région amino-terminale, toutes modifications de cette région, notamment
l’introduction d’étiquettes, altèrent l’activité enzymatique. Cette région est impliquée dans
l’interaction de la PLD1 avec ARF et Rho (Sung et al., 1999a et 1999b ; Yamazaki et al.,
1999).
II-2-5-5 La boucle centrale de PLD1
La PLD1 possède une région de 100 à 150 acides aminés au centre de la protéine (aa 505-
620), absente de la PLD2 ou des PLD des organismes inférieurs (Hammond et al., 1995 ;
Colley et al., 1997a). Cette région appelée « boucle » aurait une activité régulatrice négative.
La délétion de la région boucle ou de la partie N-terminale de PLD1 augmente l’activité
basale de l’enzyme. Ceci suggère que ces deux régions sont des domaines de régulation
négative qui permettent de maintenir l’activité basale de PLD1 à un niveau faible. L’activité
basale de PLD2, qui ne possède pas de séquence boucle, est très élevée. Cette boucle au
centre de la PLD1 serait donc impliquée dans un mécanisme d’autoinhibition, levé par des
activateurs de l’enzyme (Sung et al, 1999 a et b).
II-2-6 Régulation de la PLD
L’activité PLD des cellules de mammifères est régulée par des signaux extracellulaires
d’origine variée : hormones, neurotransmetteurs, facteurs de croissance, cytokines, antigènes
et molécules d’adhésion cellulaire. Trois classes de protéines activatrices sont impliquées
dans la régulation de l’activité PLD: les PKC et les petites protéines G monomériques des
familles Rho et ARF.
De nombreux travaux réalisés sur des cellules perméabilisées ou des membranes isolées
montrent que les protéines ARF, Rho et PKC activent la PLD de façon synergique (Geny et
Cockcroft, 1992 ; Coorson et Halsam, 1993 ; Whatmore et al., 1994). Ces observations ont été
confirmées par des expériences réalisées in vitro avec des protéines recombinantes purifiées
(Ohguchi et al., 1995 ; Singer et al., 1996). Les principales caractéristiques et mécanismes de
régulation de la PLD sont résumés dans le Tableau VI.
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