Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...

II-2-5-3 Les domaines PH et PX
Il existe dans la région N-termiale des PLD, adjacente au CRI, un domaine PH ou domaine
d’homologie à la pleckstrine (Steed et al., 1998). Ce domaine PH permet généralement une
interaction spécifique des protéines avec les inositides biphosphorylés possédant leurs
phosphates en position vivinale, comme le PIP2 (Hodgkin et al., 2000). Cependant, la délétion
de cette région N-terminale contenant le domaine PH, ne modifie pas la dépendance de la
PLD envers le PIP2, ni son activité in vitro mesurée sur des vésicules artificielles contenant
du PIP2 (Sung et al., 1999a et 1999b ; Hoer et al., 2000). Ceci implique la présence d’un autre
domaine de liaison au PIP2 responsable de l’activation de l’enzyme par ce phosphoinositide
(Sciorra et al., 1999). Ce domaine se situe entre les deux domaines HKD. Il contient un motif
riche en acides aminés aromatiques et basiques. L’association de ce domaine avec le PIP2 est
nécessaire à l’activité enzymatique des PLDs de levure et de mammifères, ce qui suggère que
ce domaine est responsable de la dépendance des PLD envers le PIP2 (Sciorra et al., 1999).
Le domaine PH semble jouer un rôle dans la localisation subcellulaire de la protéine. En effet,
Brown et ses collaborateurs ont montré que la PLD1b sauvage, exprimée dans les cellules Cos
1 et RBL-2H3, est localisée au niveau des endosomes et des lysosomes. La PLD1b délétée de
son domaine PH est exprimée de manière diffuse dans la cellule (Hodgkin et al., 2000).
Un autre domaine a été identifié dans la partie N-terminale des PLD, le domaine PX, ou
domaine d’homologie à PHOX (Ponting et Kerr., 1996 ; Liscovitch et al., 2000). Ce domaine
est impliqué dans diverses interactions protéine-protéine incluant la liaison à des kinases ou
des domaines SH3. Il a été montré récemment que ces domaines peuvent fixer PI3P,
PI(3,4)P2, PI(4,5)P2, PI(3,5)P2 et PI(3,4,5)P3 (Xu et al., 2001). Des mutations ponctuelles à
ce niveau n’altère que faiblement l’activité de l’enzyme, suggérant que le domaine PX n’est
pas essentiel pour la catalyse in vitro.
II-2-5-4 Les régions amino et carboxy-terminales
Les régions N-terminales des PLD de nombreuses espèces, de la levure à l’homme, sont
relativement peu conservées et semblent tolérer des modifications comme la fusion à d’autres
protéines telles que la protéine fluorescente verte (GFP). Ces modifications n’influent pas sur
l’activité PLD (Hammond et al., 1995 ; Sung et al., 1997). Dans cette partie N-terminale de
PLD1 se trouve une zone qui serait impliquée dans la régulation par la PKC (Xie et al., 1998 ;
Sung et al., 1999b). Ainsi des mutants de PLD1 délétés de leur partie N-terminale perdent leur
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