Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...

II-2 La phospholipase D
II- 2-1 Introduction
La phospholipase D (PLD) est une phosphodiestérase qui catalyse l’hydrolyse de la liaison
phosphodiester distale d’un phospholipide pour libérer d’une part sa tête polaire, et d’autre
part l’acide phosphatidique (PA). Le substrat majeur de la PLD des mammifères est la
phosphatidylcholine (PC), un des principaux phospholipides des membranes plasmiques.
L’activité PLD a été découverte par Hanahan et Chaikoff dans les feuilles de chou en 1947.
Elle a longtemps été considérée comme une enzyme typique du règne végétal. Aujourd’hui,
cette enzyme apparaît ubiquitaire. Elle a été retrouvée chez l’ensemble des êtres vivants :
plantes, organismes procaryotes, levures et mammifères.
La première description d’une activité PLD chez les mammifères a été réalisée par Saito et
Kanfer en 1973 dans des extraits membranaires de cerveau de rat (Saito et Kanfer, 1973 ;
1975). Ce n’est que dans les années 1980 que cette activité a été impliquée dans la
transduction du signal via des récepteurs membranaires (Billah et al., 1989). Plusieurs
tentatives de purification à homogénéité de la PLD ont échoué, principalement à cause d’une
perte de l’activité enzymatique au cours des différentes étapes de purification. Cette activité a
pu être conservée et caractérisée, après purification partielle, six ans plus tard (Taki et Kanfer,
1979). La première purification à homogénéité a été réalisée en 1994 par Okamura et
Yamashita. Depuis lors, les travaux portant sur l’identification, la purification, l’isolement de
la PLD et la détermination de son mécanisme d’action se sont succédés.
II-2-2 La réaction d’hydrolyse catalysée par la PLD
Dans les conditions physiologiques, la PLD des mammifères hydrolyse la PC pour générer le
PA et la choline. En présence d’un alcool primaire, la PLD catalyse une réaction de
transphosphatidylation qui est spécifique de cette famille d’enzyme. Le transfert du
groupement phospatidyl se fait alors sur l’alcool qui est un meilleur accepteur nucléophile
(1000 fois plus d’affinité) que l’eau (Yang et al., 1967 ; Frohman et al., 1999). On observe
ainsi la formation de phosphatidylalcool aux dépens du PA. Ce phospholipide non
physiologique est un métabolite stable. Il permet donc un dosage fiable et spécifique de
l’activité PLD dans les cellules intactes (Morris et al., 1997a) (Figure 7).
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