Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...
Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...
Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
Tableau IV : Techniques d’analyse <strong>de</strong>s ra<strong>de</strong>aux lipidiques (Pizzo <strong>et</strong> Viola, 2004).<br />
Métho<strong>de</strong>s Informations obtenues cellules<br />
vivantes ?<br />
Avantages <strong>et</strong> limites<br />
Extraction <strong>biochimique</strong><br />
(utilisation <strong>de</strong> détergents non ioniques)<br />
• Présence / absence <strong>de</strong> molécules<br />
spécifiques dans les DRMs<br />
Non<br />
• Facile, protocole non standardisé.<br />
• Artéfacts possibles.<br />
• Ne perm<strong>et</strong> pas <strong>de</strong> détecter les faibles<br />
associations.<br />
Déplétion du cholestérol<br />
• Les fonctions cellulaires associées au<br />
cholestérol <strong>de</strong>s membranes (intégrité <strong>de</strong>s<br />
rafts)<br />
Oui<br />
• Possibilité d’eff<strong>et</strong>s secondaires <strong>de</strong>s<br />
drogues utilisées pour séquestrer le<br />
cholestérol.<br />
Marquage avec <strong>de</strong>s anticorps <strong>et</strong><br />
microscopie à fluorescence<br />
• Co-localisation <strong>de</strong> certaines molécules<br />
avec les marqueurs <strong>de</strong>s rafts.<br />
• dynamique <strong>de</strong>s rafts dans les processus<br />
cellulaires<br />
Oui / Non<br />
• facile ; problème <strong>de</strong> quantification<br />
<strong>de</strong>s données.<br />
• analyse <strong>de</strong>s rafts dans <strong>de</strong>s<br />
conditions d’activation cellulaire<br />
Fluorescence par énergie <strong>de</strong> transfert<br />
<strong>de</strong> résonance (FRET) 1<br />
• Assemblage <strong>de</strong>s molécules dans les<br />
microdomaines.<br />
• la dimension <strong>de</strong>s rafts.<br />
Oui<br />
• technique informative<br />
• artéfact possibles<br />
Suivi <strong>de</strong> particule individuelle (SPT) 2<br />
• dynamique d’une molécule associée<br />
aux rafts<br />
• durée <strong>de</strong> vie <strong>et</strong> dimensions <strong>de</strong>s rafts<br />
Oui<br />
• technique très informative<br />
• nécessite <strong>de</strong>s équipements très<br />
spécifiques <strong>et</strong> une gran<strong>de</strong> expérience.<br />
1 FRET : Fluorescence Resonance Energy Transfert ; 2 SPT : Single particle Tracking microscopy<br />
43
Change language