Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...

acylation (N-palmitoylation et S-myristoylation) est nécessaire pour permettre leur ancrage
aux DRMs (Shenoy-Scaria et al., 1994).
D’autres protéines sont liées au feuillet externe des microdomaines par une ancre GPI (Brown
et Rose, 1992, Sargiacomo et al., 1993). L’enrichissement particulier de ces protéines à pied
d’ancrage GPI dans les DRMs a conduit à considérer leur présence comme un indicateur du
degré de purification des microdomaines. Les protéines à ancre GPI les plus souvent décrites
comme marqueurs des microdomaines sont : la phosphatase alcaline (Brown et Rose, 1992),
la 5’-nucléotidase (Diaz et al., 2002), les protéines Thy1 et Thy 2 et le prion (Madore et al.,
1999).
II-1-4-3 Radeaux lipidiques : réalité ou artéfact ?
La première préparation de radeaux lipidiques a été décrite par Brown et Rose en 1992. Après
traitement des lysats de cellules épithéliales par le triton X-100 à froid, ces auteurs ont isolé
une fraction résistant à la solubilisation par centrifugation sur gradient de saccharose. Le
traitement des membranes à 37°C par le Triton X-100 ne permet d’obtenir qu’une faible
quantité de matériel membranaire. Ceci aurait pu signifier que les radeaux n’existent qu’à
4°C. En outre, leur petite taille les rend invisibles en microscopie classique. A cause de ces
contraintes, l’existence de DRMs in vivo a été mise en doute. Cependant, plusieurs approches
expérimentales récentes sont en faveur de leur existence dans les membranes des cellules
vivantes (pour revue voir Horejsi, 2003).
Parmi les alternatives aux méthodes biochimiques de fractionnement cellulaire, les approches
chimiques (pontage chimique des molécules de surface) et biophysiques (FRET, Single
particle tracking, laser trap ou single dye tracking) ont permis de déterminer la composition
lipidique et protéique des microdomaines ainsi que leurs caractéristiques physicochimiques et
leur taille.
D’autre part, les expériences réalisées sur des membranes modèles (Ahmed et al., 1997 ;
Schroeder et al., 1998) ont permis de montrer que la membrane préexiste dans une phase Lo
avant l’utilisation de détergent, et que c’est bien l’existence de cette phase Lo qui conditionne
la résistance au Triton X-100. Dans ces travaux, l’état de phase Lo est provoqué par l’ajout de
cholestérol à un mélange de PC et SM dans des rapports molaires physiologiques.
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