Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...

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14.09.2014 Views

phospholipides et des différentes classes de lipides constitutifs. Il serait aussi possible de réaliser un co-immunomarquage de la protéine PLD1 et de marqueurs spécifiques des microdomaines tels que le GM1. Ceci permettrait de voir l’effet des régimes sur la localisation de la PLD dans les radeaux lipidiques par électrophorèse et par des approches en microscopie à fluorescence. Les anticorps anti-PLD1 et PLD2 dont nous disposons pourraient être utilisés dans des expériences d’immunofluorescence après perméabilisation des cellules, couplage à un anticorps secondaire et fixation des thymocytes sur lames. Cette approche permettrait de déterminer s’il existe une relation entre l’enrichissement en acides gras des radeaux lipidiques et la délocalisation de la protéine PLD. Pour compléter cette étude, il serait intéressant d’étudier les effets des régimes sur la composition en acides gras et l’activité PLD d’autres organes (rate, foie, cœur, tissu adipeux). Il serait aussi important de confirmer nos résultats obtenus chez le rat par une étude clinique. Cette étude pourrait prendre en compte des paramètres supplémentaires fonctionnels comme la production de cytokines ou l’activité des cellules NK ou, biochimiques comme la production d’eicosanoïdes et l’expression des molécules de surface. 162

VII- Références bibliographiques ABOUSALHAM, A., LIOSSIS, C., O'BRIEN, L., BRINDLEY, D. N. Cell-Permeable Ceramides Prevent the Activation of Phospholipase D by Adp-Ribosylation Factor and Rhoa. J Biol Chem., 1997, vol. 272(2), p .1069-1075. AHMED, S. N., BROWN, D. A., LONDON, E. On the Origin of Sphingolipid/Cholesterol- Rich Detergent-Insoluble Cell Membranes: Physiological Concentrations of Cholesterol and Sphingolipid Induce Formation of a Detergent-Insoluble, Liquid-Ordered Lipid Phase in Model Membranes. Biochemistry., 1997, vol. 36(36), p. 10944-10953. ALEXANDER, N. J., SMYTHE, N. L. Dietary Fat Modulation of in Vitro Lymphocyte Function. Ann Nutr Metab., 1988, vol. 32(4), p. 192-199. ANTHES, J. C., WANG, P., SIEGEL, M. I., EGAN, R. W., BILLAH, M. M. Granulocyte Phospholipase D Is Activated by a Guanine Nucleotide Dependent Protein Factor. Biochem Biophys Res Commun., 1991, vol. 175(1), p. 236-243. BAE, C. D., MIN, D. S., FLEMING, I. N., EXTON, J. H. Determination of Interaction Sites on the Small G Protein Rhoa for Phospholipase D. J Biol Chem., 1998, vol. 273(19), p. 11596-11604. BALASUBRAMANIAN, K., SCHROIT, A. J. Aminophospholipid Asymmetry: A Matter of Life and Death. Annu Rev Physiol., 2003, vol. 65, p. 701-734. BALBOA, M. A., BALSINDE, J., DENNIS, E. A., INSEL, P. A. A Phospholipase D- Mediated Pathway for Generating Diacylglycerol in Nuclei from Madin-Darby Canine Kidney Cells. J Biol Chem., 1995, vol. 270(20), p. 11738-11740. BALBOA, M. A., FIRESTEIN, B. L., GODSON, C., BELL, K. S., INSEL, P. A. Protein Kinase C Alpha Mediates Phospholipase D Activation by Nucleotides and Phorbol Ester in Madin-Darby Canine Kidney Cells. Stimulation of Phospholipase D Is Independent of Activation of Polyphosphoinositide-Specific Phospholipase C and Phospholipase A2. J Biol Chem., 1994, vol. 269(14), p. 10511-10516. 163

VII- Références bibliographiques<br />

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Sphingolipid Induce Formation of a D<strong>et</strong>ergent-Insoluble, Liquid-Or<strong>de</strong>red Lipid Phase in<br />

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