Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...

IV-1-3-3 Dosage du cholestérol et des phospholipides
Les microdomaines sont caractérisés par leur richesse en cholestérol qui semble jouer un rôle
majeur dans la cohésion de leur structure et le recrutement des protéines de signalisation, en
particulier les protéines à ancre GPI. Le dosage réalisé sur une aliquote de chacune des
fractions du gradient montre un enrichissement en cholestérol des fractions de faible densité
(14 à 20%) (Figure 40). L’enrichissement en cholestérol de ces fractions de faible densité est
cohérent avec les caractéristiques des microdomaines telles qu’elles sont décrites dans la
littérature. D’autre part, la quantification des phospholipides par la méthode de Stewart
indique que ceux-ci sont massivement présents dans les fractions denses (d>27%) (Figure
41).
30
25
Cholestérol
CST
% de Saccharose
40
35
30
Cholestérol CST (µg/ml) (µg/ml)
20
15
10
5
25
20
15
10
5
% de saccharose
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
0
n° Fraction
Figure 40 : Distribution du cholestérol dans les différentes fractions du gradient de
saccharose.
Les microdomaines sont préparés comme décrit dans Matériels et Méthodes et les fractions sont
collectées de 1 (fond du tube) à 11 (Sommet du tube). Le cholestérol est dosé par réaction
enzymatique, comme décrit dans Matériels et méthode, sur chaque fraction du gradient. Les résultats
sont exprimés en µg/ml et représentent la moyenne ± SEM de 3 expériences indépendantes.
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