Tableau XV c : Composition en aci<strong>de</strong>s gras <strong>de</strong>s phospholipi<strong>de</strong>s <strong>de</strong>s thymocytes après enrichissement par les aci<strong>de</strong>s gras saturés. Aci<strong>de</strong>s gras Contrôle 14:0 18:0 AG/HSA =1 AG/HSA=3 AG/HSA =1 AG/HSA=3 14:0 0,58 ± 0,12 a 1,01 ± 0,23 b 2,65 ± 0,27 c 0,68 ± 0,10 a,b 0,47 ± 0,14 a,b 16:0 18:0 18:1 n-9 18:1 n-7 18:2 n-6 20:4 n-6 20:5 n-3 22:5 n-3 22:6 n-3 30,12 ± 0,55 a 19,86 ± 0,33 10,70 ± 0,24 7,45 ± 0,15 7,35 ± 0,28 23,29 ± 0,55 0,07 ± 0,03 0,10 ± 0,03 0,49 ± 0,07 25,43 ± 1,54 b 19,06 ± 1,07 11,40 ± 1,13 7,51 ± 0,70 7,84 ± 0,41 27,35 ± 1,05 0 ± 0 0 ± 0 0,39 ± 0,20 26,10 ± 1,38 b 18,60 ± 0,74 10,76 ± 0,89 7,24 ± 0,64 7,73 ± 0,43 26,29 ± 1,27 0, 08 ± 0,08 0 ± 0 0,35 ± 0,18 27,46 ± 1,68 a,b 19,56 ± 0,65 11,23 ± 1,00 6,70 ± 0,16 7,61 ± 0,89 26,43 ± 0,73 0 ± 0 0 ± 0 0,34 ± 0,05 25,08 ± 2,09 a,b 20,55 ± 0,39 10,99 ± 1,02 6,72 ± 0,37 7,67 ± 0,62 28,11 ± 0,24 0 ± 0 0 ± 0 0,39 ± 0,04 ∑AGS ∑AGPI n-6 ∑AGPI n-3 ∑AGMI 50,55 ± 0,56 a 30,65 ± 0,41 0,64 ± 0,10 18,15 ± 0,30 45,51 ± 0,70 b 35,19 ± 0,80 0,58 ± 0,04 19,30 ± 0,60 47,34 ± 0,81 b 34,02 ± 0,93 0,65 ± 0,16 18,20 ± 0,60 47,69 ± 1,89 a,b 34,04 ± 0,74 0,34 ± 0,11 17,92 ± 1,12 46,11 ± 2,07 a,b 35,79 ± 0,70 0,39 ± 0,08 17,71 ± 1,31 n-6/n-3 48,87 ± 5,23 61,20 ± 6,72 57,19 ± 16,40 99,18 ± 12,88 90,84 ± 5,25 UI 134,8 ± 3,1 146,31 ± 3,2 141,3 ± 3,9 140.9 ± 3,9 147,9 ± 3,3 Les valeurs représentent la moyenne ± SEM <strong>de</strong> 3 expériences indépendantes. Les résultats sont analysés par ANOVA <strong>et</strong> les moyennes comparées par un test <strong>de</strong> t-protégé. Des l<strong>et</strong>tres différentes indiquent <strong>de</strong>s différences significatives (P≤0,05). Si aucune l<strong>et</strong>tre n’apparaît dans une ligne, les valeurs ne sont pas statistiquement différentes. Abréviations : HSA : albumine sérique humaine, AGS, aci<strong>de</strong>s gras saturés ; AGMI, aci<strong>de</strong>s gras monoinsaturés ; AGPI, aci<strong>de</strong>s gras polyinsaturés; UI, in<strong>de</strong>x d’insaturation (somme <strong>de</strong>s mol% x nombre <strong>de</strong> doubles liaisons). ). Le rapport AG/HSA=1 correspond à une concentration en AG égale à 5µM ; le rapport AG/HSA=3 correspond à une concentration en AG égale à 15µM. 126
PBut (%<strong>de</strong> la radioactivité <strong>de</strong>s phospholipi<strong>de</strong>s totaux) 0.35 0.30 0.25 0.20 0.15 0.10 0.05 0 non stimulés stimulés avec la ConA contrôle 1 3 contrôle 1 3 22:6n -3 20:5n -3 18:1n -9 18:2n -6 14:0 18:0 Aci<strong>de</strong> gras/albumine Figure 35 : Eff<strong>et</strong>s <strong>de</strong>s aci<strong>de</strong>s gras in vitro sur l’activité phospholipase D <strong>de</strong>s thymocytes. Les cellules marquées avec une dose traceuse d’aci<strong>de</strong> arachidonique tritié sont suspendues à une concentration <strong>de</strong> 40 x 10 6 cellules/ ml. Elles sont incubées pendant 2h à 37°C avec <strong>de</strong> l’albumine seule (HSA 5µM) ou avec les différents complexes aci<strong>de</strong> gras-albumine (rapports 1 <strong>et</strong> 3 correspondant à 5 <strong>et</strong> 15 µM d’aci<strong>de</strong> gras, respectivement). Les cellules sont incubées en présence ou absence <strong>de</strong> butanol- 1 (concentration finale <strong>de</strong> 1%) pendant 20 min, puis 5 min avec ou sans ConA (1µg/ 10 6 cellules). La réaction est arrêtée par extraction <strong>de</strong>s lipi<strong>de</strong>s puis l’extrait lipidique est séparé par CCM bidimensionnelle comme décrit dans Matériels <strong>et</strong> Métho<strong>de</strong>s. La radioactivité associée au phosphatidylbutanol est exprimée en pourcentage <strong>de</strong> la radioactivité associée aux phospholipi<strong>de</strong>s totaux. Les résultats sont la moyenne ± SEM <strong>de</strong> 3 expériences indépendantes. Les résultats statistiques <strong>de</strong> l‘analyse <strong>de</strong> variance à <strong>de</strong>ux voies sont les suivants : 22:6n-3 :eff<strong>et</strong> aci<strong>de</strong> gras vs contrôle : F=12,90, P=0,0001 ; eff<strong>et</strong> ConA vs non stimulé : F=18,31, P=0,0002. 20:5n-3 :eff<strong>et</strong> aci<strong>de</strong> gras vs contrôle : F=0,44, NS ; eff<strong>et</strong> ConA vs non stimulé : F=8,94, P=0,007. 18:1n-9 :eff<strong>et</strong> aci<strong>de</strong> gras vs contrôle : F=2,38, NS ; eff<strong>et</strong> ConA vs non stimulé : F=18,94, P=0,0002. 18:2n-6 :eff<strong>et</strong> aci<strong>de</strong> gras vs contrôle : F=12,53, P=0,0002 ; eff<strong>et</strong> ConA vs non stimulé : F=24,13, P
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