Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...

L’ensemble des résultats concernant la caractérisation de la PLD indique qu’aussi bien
PLD1a, PLD1b et PLD2 sont présentes dans les thymocytes de rat. En revanche, ces cellules
semblent être dépourvues d’activité PLD oléate sensible.
IV-1-2-2 Effet des acides gras «in vitro» sur l’activité PLD
Afin de déterminer l’effet des acides gras sur l’activité PLD, les thymocytes sont tout d’abord
préincubés pendant 2h avec les différents acides gras complexés à de l’albumine humaine
délipidée (rapports acide gras-albumine de 1 et 3 correspondant à des concentrations en acides
gras de 5 et 15µM, respectivement). A la fin de l’incubation, une aliquote est prélevée afin de
déterminer le degré d’enrichissement en acides gras des phospholipides par chromatographie
en phase gazeuse.
Les phospholipides représentent la classe lipidique majoritaire dans les membranes
cellulaires, c’est pourquoi nous avons étudié les modifications de leur composition en
fonction des différents enrichissements réalisés. Une incubation de 2h est suffisante pour
modifier de façon significative la composition des phospholipides en acides gras (Tableau XV
a, b et c). L’incubation des thymocytes avec un acide gras donné, sauf pour les acides
stéarique et oléique, augmente sa proportion dans les phospholipides des cellules. On
remarque par ailleurs que le 20:5n-3 est l’acide gras le mieux incorporé comparativement aux
autres acides gras, l’incorporation de l’acide oléique et stéarique étant la moins efficace.
L’enrichissement se fait d’une manière dose-dépendante. Ainsi, pour le rapport acide gras :
albumine=1, la quantité de 18:2n-6 augmente de 1,3 fois par rapport au contrôle; celle du
20:5n-3 augmente de plus de 18 fois. Pour le 22:6n-3, l’augmentation est de 1,5 fois et pour le
14:0 l’augmentation est de 1,7 fois. Au rapport 3, les augmentations sont de 1,4 fois pour le
18:2n-6, plus de 36 fois pour le 20:5n-3, 2,5 fois pour le 22:6n-3 et 4,6 fois pour le 14:0.
Concernant les effets des acides gras sur l’activité PLD (Figure 36), les résultats montrent
d’une part que le 22:6n-3, le 18:2n-6 et le 14:0 augmentent significativement l’activité PLD
basale et stimulée (P=0,0001, 0,0002 et 0,027 respectivement). L’effet activateur du 18:1n-9
n’est pas statiquement significatif probablement en raison de sa faible incorporation dans les
phospholipides. Le 18:0 et le 20:5n-3 n’ont pas d’effet sur l’activité PLD. Il est à noter que le
20:5n-3 ne modifie pas l’activité PLD des thymocytes de rat malgré son incorporation
efficace dans les phospholipides des thymocytes.
123