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Etude biochimique et nutritionnelle de l'effet immunomodulateur des ...

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Viabilité cellulaire<br />

(% du contrôle)<br />

150<br />

100<br />

50<br />

22:6n-3<br />

20:5n-3<br />

18:1n-9<br />

18:2n-6<br />

14:0<br />

16:0<br />

18:0<br />

0<br />

0 0,5 1 1,5 2 2,5 3<br />

Aci<strong>de</strong> gras / Albumine<br />

Figure 28 : Eff<strong>et</strong>s <strong>de</strong>s aci<strong>de</strong>s gras in vitro sur la viabilité cellulaire <strong>de</strong>s thymocytes <strong>de</strong> rat.<br />

Les thymocytes (2.5 10 5 cellules/ puits, plaque à 96 puits) sont mis en culture dans un milieu contenant<br />

le complexe aci<strong>de</strong> gras albumine à différents rapports allant <strong>de</strong> 0.5 à 3 (concentrations en aci<strong>de</strong> gras<br />

<strong>de</strong> 15 à 90 µM) en absence du mitogène. Après 68h d’incubation, le MTT <strong>et</strong> la solution <strong>de</strong><br />

solubilisation sont ajoutés dans chaque puits comme décrit dans la partie Matériels <strong>et</strong> Métho<strong>de</strong>s. La<br />

<strong>de</strong>nsité optique est lue à 550 <strong>et</strong> 690 nm. La viabilité cellulaire est estimée par la différence <strong>de</strong>s<br />

<strong>de</strong>nsités optiques mesurées à 550 <strong>et</strong> 690 nm (D.O 550 -D.O 690 ) <strong>et</strong> normalisée par rapport à la différence<br />

<strong>de</strong> DO mesurée pour les cellules témoins incubées sans aci<strong>de</strong> gras, considérée comme 100%. Les<br />

résultats représentent la moyenne <strong>de</strong> 3 expériences indépendantes, réalisées en 6 exemplaires. Les<br />

SEM, inférieurs à 10% <strong>de</strong>s valeurs moyennes, ne sont pas montrés sur le graphe.<br />

Tous les aci<strong>de</strong>s gras testés, sauf l’aci<strong>de</strong> stéarique (18:0) qui se montre très peu inhibiteur,<br />

induisent une diminution dose-dépendante <strong>de</strong> la réponse proliférative <strong>de</strong>s thymocytes <strong>de</strong> rat à<br />

la ConA (Figure 29). L’inhibition la plus importante est obtenue avec les aci<strong>de</strong>s gras <strong>de</strong> la<br />

famille n-3, quel que soit le rapport aci<strong>de</strong> gras-albumine utilisé. A partir <strong>de</strong>s résultats<br />

présentés dans la figure 29, les rapports aci<strong>de</strong> gras-albumine donnant 50% d’inhibition <strong>de</strong> la<br />

réponse proliférative ont pu être extrapolés comme suit : 20:5n-3, 0,35 ; 22:6n-3, 0,5 ; 14 :0,<br />

0,9 ; 16:0, 1 ; 18:1n-9, 1,5 <strong>et</strong> 18:2n-6, 2. Il est à noter qu’au rapport aci<strong>de</strong> gras-albumine <strong>de</strong> 3,<br />

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