maenas (intertidal zone) and Segonzacia mesatlantica - Station ...

2.1. L’ESI-MS ET LES PIGMENTS RESPIRATOIRES 61
en premiers (figure 2.3). La présence d’un rélectron en bout de tube permet de refocaliser les ions de
même rapport m/z et de corriger la dispersion cinétique des ions, tout en augmentant la distance de
vol sans augmenter la taille de l’appareil. Le TOF ne présente pas de limite théorique au rapport m/z
détectable puisqu’il s’agit d’un chronométrage du temps de vol des ions (Verentchikov et al., 1994,
Tang et al., 1994).
Des systèmes en tandem existent afin de caractériser des peptides précis présents dans un mélange.
Une première analyse en Q peut par exemple révéler un ion que l’on désire caractériser ; il est
alors sélectionné et transmis par le premier analyseur, puis traverse une chambre de collision à faible
pression de gaz dans laquelle l’ion est fragmenté. Les produits de collision sont alors séparés par le
deuxième analyseur. Ce type d’analyse permet par exemple d’obtenir des microséquences protéiques.
On caractérise un analyseur de ce type par l’association des deux analyseurs : Q-TOF, TOF-TOF. Un
analyseur en tandem de type Q-TOF peut aussi être utilisé avec une composante continue nulle (mode
RF, Radio Frequence) sur le quadripôle afin d’agir uniquement comme un focaliseur avant l’analyse
en TOF.
Spectres obtenus à en ESI-MS
Le spectre brut obtenu en MS présente des données en terme de rapport m/z. La masse m d’un
composé peut être déterminée si la charge z est connue. Dans le cas d’une source MALDI, les ions
sont en général monochargés : z = 1, ce qui permet de calculer m. Dans le cas d’une source ESI, une
distribution d’ions multichargés (M+nH + ) n+ est en général obtenue pour chaque composé. Le spectre
présente alors une série de pics différant chacun d’une charge. La masse peut être calculée en utilisant
deux pics successifs de rapport m/z p 1 et p 2 et de charge n et n+1pour lesquels on a :
p 1 = m+n.m H +
n
La masse d’un ion H + étant de 1 g.mol −1 , on déduit :
et p 2 = m+(n+1)m H +
n+1
n = p 1 − 1
p 2 − p 1
et m = (p 1 − 1)(p 2 − 1)
p 2 − p 1
Dans la pratique, un spectre ESI-MS obtenu à partir d’un mélange peut rapidement devenir très
complexe en raison du chevauchement des distributions. Des programmes de déconvolution sont alors
utilisés pour convertir le spectre en m/z en un spectre dit zéro de charge, en m uniquement (programme
MaxEnt pour Maximum Entropy).
D’un point de vue quantitatif, les spectres de masse ne permettent pas de quantifier des abondances
de composés de manière absolue, car l’intensité d’un pic dépend également de la facilité avec laquelle