maenas (intertidal zone) and Segonzacia mesatlantica - Station ...

260 TABLE DES MATIÈRES
2.2 Le MALLS et les pigments respiratoires . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
2.2.1 Principe de la diffusion de lumière . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
2.2.2 Utilisation du MALLS pour l’étude de complexes non-covalents . . . . . . . 67
2.2.3 Autres possibilités du MALLS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69
2.2.4 Application du MALLS à l’étude des pigments respiratoires . . . . . . . . . 69
2.3 Article de revue ESI-MS et MALLS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 70
2.4 Conclusion : intérêt de la spectrométrie de masse et de la diffusion de lumière pour
l’étude de l’Hc . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 102
3 Interaction de l’hémocyanine de Carcinus maenas avec le L-lactate et les cations divalents
: étude par spectrométrie de masse 103
3.1 Problématique et objectifs de l’étude . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 104
3.1.1 Liaison et effet du L-lactate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 104
3.1.2 Rôle structural et effet des cations divalents . . . . . . . . . . . . . . . . . . 106
3.1.3 Problématique et approche expérimentale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107
3.2 Manuscrit : Structural study of Carcinus maenas hemocyanin by supramolecular ESI-
MS : interaction with L-lactate and divalent cations . . . . . . . . . . . . . . . . . . 108
3.2.1 Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 111
3.2.2 Experimental procedures . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 113
3.2.3 Results . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 116
3.2.4 Discussion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 125
3.2.5 Conclusion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 129
3.3 Bilan et perspectives . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 131
4 Etude de la plasticité phénotypique de l’Hc de Carcinus maenas 133
4.1 Introduction : la plasticité phénotypique des Hc de Crustacés . . . . . . . . . . . . . 134
4.1.1 La plasticité interspécifique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 134
4.1.2 La plasticité intraspécifique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 135
4.1.3 Bilan . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 137
4.2 Objectifs de l’étude . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 137
4.3 Matériels et méthodes communs . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 138
4.3.1 Prélévement d’hémolymphe sur les crabes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 138
4.3.2 Dosage de protéine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 138
4.3.3 Chromatographie et MALLS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 138
4.3.4 Electrophorèse sur gel d’acrylamide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 139