maenas (intertidal zone) and Segonzacia mesatlantica - Station ...

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254 LISTE DES FIGURES 2.3 Principe des analyseurs quadripôle (Q) et temps de vol (TOF) . . . . . . . . . . . . . 60 2.4 ESI-MS supramoléculaire et dénaturante appliquées à l’Hc de Crustacé . . . . . . . 64 2.5 Induction d’un dipôle oscillant sous l’effet d’un laser . . . . . . . . . . . . . . . . . 66 2.6 Diffusion de lumière d’un dimère . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 66 2.7 Schéma d’un système SEC-MALLS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 67 2.8 Profil SEC-MALLS typique de l’hémolymphe de Carcinus maenas . . . . . . . . . . 68 3.1 Structure du L-lactate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 105 3.2 Différentes modalités hypothétiques de fixation du L-lactate à l’Hc . . . . . . . . . . 106 3.3 Mass spectrum of Carcinus maenas native hemolymph analysed in non-covalent conditions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 117 3.4 Alkaline dissociation of Carcinus maenas hemocyanin by TEA . . . . . . . . . . . . 118 3.5 Acidic reassociation of Carcinus maenas hemocyanin by formic acid . . . . . . . . . 120 3.6 Acidic reassociation of Carcinus maenas hemocyanin by lactic acid . . . . . . . . . 122 3.7 Alkaline dissociation and formic acid reassociation of purified Carcinus maenas hemocyanin dodecamers and hexamers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 123 3.8 Alkaline dissociation and acidic reassociation of Carcinus maenas hemocyanin coupled with chelation of divalent cations by EDTA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 124 4.1 Spectres FPLC d’hémolymphe de crabes acclimatés à une hypo ou une hypersalinité 142 4.2 Détermination des pics gaussiens d’un échantillon hyposalin . . . . . . . . . . . . . 143 4.3 Biplot de l’effet de la salinité sur l’abondances des différents complexes . . . . . . . 144 4.4 PAGE natif sur hémolymphe de crabes acclimatés à différentes salinités . . . . . . . 144 4.5 Conditions d’acclimatation en laboratoire pour C. maenas . . . . . . . . . . . . . . . 146 4.6 PAGE natif des échantillons acclimatés à différentes salinités . . . . . . . . . . . . . 148 4.7 Spectre ESI-MS des complexes natifs d’Hc de Carcinus maenas . . . . . . . . . . . 150 4.8 Spectre ESI-MS des complexes natifs d’Hc présentant un hexamère particulier . . . . 151 4.9 Spectre ESI-MS en conditions dénaturantes d’hexamère de Carcinus maenas . . . . 152 4.10 Spectre ESI-MS en conditions dénaturantes de dodécamère de Carcinus maenas . . . 153 4.11 Abondance des sous-unités en normoxie et en oxygénation variable . . . . . . . . . 154 4.12 Abondances relatives des sous-unités en acclimatation couplée à l’hypoxie et à différentes salinités . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 157 4.13 Effet de l’acclimatation en hypoxie sur la composition en sous-unités . . . . . . . . . 158 4.14 Sites de prélévement des populations estuariennes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 160 4.15 Profil SEC-MALLS de l’hémolymphe d’un crabe du Pont Eon . . . . . . . . . . . . 162 4.16 Profil SEC-MALLS de l’hémolymphe d’un crabe du Pont de la Corde . . . . . . . . 163

LISTE DES FIGURES 255 4.17 Profils PAGE dénaturant et natif de crabes estuariens . . . . . . . . . . . . . . . . . 165 4.18 Profils PAGE dénaturant et natif de complexes purifiés après stabulation . . . . . . . 166 5.1 Segonzacia mesatlantica dans l’environnement hydrothermal . . . . . . . . . . . . . 174 5.2 Carte des sites hydrothermaux de la MAR situés près du point triple des Açores . . . 176 5.3 Equipements de la campagne MoMARETO 2006 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 177 5.4 Systèmes DESEARES et SYRENE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 178 5.5 Hemolymph composition for control and acclimated crabs for each experiment . . . 189 5.6 Hemocyanin complex proportion in Segonzacia mesatlantica hemolymph . . . . . . 190 5.7 Biplot graphs of the RDA performed between hemolymph composition and acclimation conditions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 193 5.8 Examples of supramolecular ESI-MS spectra of Segonzacia mesatlantica native Hc . 195 5.9 Examples of ESI-MS deconvoluted mass spectra in denaturing conditions for purified dodecamers and hexamers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 196 5.10 Relative abundances of the 16 subunits in Segonzacia mesatlantica whole hemolymph samples and purified complexes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 197 5.11 Biplot graph of the RDA of the repartition of main subunits between Hc dodecamers and hexamers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 199 5.12 Biplot graph of the RDA of the hemolymph composition effect on complex proportions200 5.13 L-lactate and pH effect on Segonzacia mesatlantica Hc affinity . . . . . . . . . . . . 201 5.14 Urate effect on Segonzacia mesatlantica Hc affinity . . . . . . . . . . . . . . . . . . 202 5.15 Magnesium effect on Segonzacia mesatlantica and Carcinus maenas Hc affinity . . . 203 A.1 Représentation linéaire pour la détermination des masses des hexamères . . . . . . . 229 B.1 Distribution de masses des hexamères d’Hc . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 235

254 LISTE DES FIGURES<br />

2.3 Principe des analyseurs quadripôle (Q) et temps de vol (TOF) . . . . . . . . . . . . . 60<br />

2.4 ESI-MS supramoléculaire et dénaturante appliquées à l’Hc de Crustacé . . . . . . . 64<br />

2.5 Induction d’un dipôle oscillant sous l’effet d’un laser . . . . . . . . . . . . . . . . . 66<br />

2.6 Diffusion de lumière d’un dimère . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 66<br />

2.7 Schéma d’un système SEC-MALLS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 67<br />

2.8 Profil SEC-MALLS typique de l’hémolymphe de Carcinus <strong>maenas</strong> . . . . . . . . . . 68<br />

3.1 Structure du L-lactate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 105<br />

3.2 Différentes modalités hypothétiques de fixation du L-lactate à l’Hc . . . . . . . . . . 106<br />

3.3 Mass spectrum of Carcinus <strong>maenas</strong> native hemolymph analysed in non-covalent conditions<br />

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 117<br />

3.4 Alkaline dissociation of Carcinus <strong>maenas</strong> hemocyanin by TEA . . . . . . . . . . . . 118<br />

3.5 Acidic reassociation of Carcinus <strong>maenas</strong> hemocyanin by formic acid . . . . . . . . . 120<br />

3.6 Acidic reassociation of Carcinus <strong>maenas</strong> hemocyanin by lactic acid . . . . . . . . . 122<br />

3.7 Alkaline dissociation <strong>and</strong> formic acid reassociation of purified Carcinus <strong>maenas</strong> hemocyanin<br />

dodecamers <strong>and</strong> hexamers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 123<br />

3.8 Alkaline dissociation <strong>and</strong> acidic reassociation of Carcinus <strong>maenas</strong> hemocyanin coupled<br />

with chelation of divalent cations by EDTA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 124<br />

4.1 Spectres FPLC d’hémolymphe de crabes acclimatés à une hypo ou une hypersalinité 142<br />

4.2 Détermination des pics gaussiens d’un échantillon hyposalin . . . . . . . . . . . . . 143<br />

4.3 Biplot de l’effet de la salinité sur l’abondances des différents complexes . . . . . . . 144<br />

4.4 PAGE natif sur hémolymphe de crabes acclimatés à différentes salinités . . . . . . . 144<br />

4.5 Conditions d’acclimatation en laboratoire pour C. <strong>maenas</strong> . . . . . . . . . . . . . . . 146<br />

4.6 PAGE natif des échantillons acclimatés à différentes salinités . . . . . . . . . . . . . 148<br />

4.7 Spectre ESI-MS des complexes natifs d’Hc de Carcinus <strong>maenas</strong> . . . . . . . . . . . 150<br />

4.8 Spectre ESI-MS des complexes natifs d’Hc présentant un hexamère particulier . . . . 151<br />

4.9 Spectre ESI-MS en conditions dénaturantes d’hexamère de Carcinus <strong>maenas</strong> . . . . 152<br />

4.10 Spectre ESI-MS en conditions dénaturantes de dodécamère de Carcinus <strong>maenas</strong> . . . 153<br />

4.11 Abondance des sous-unités en normoxie et en oxygénation variable . . . . . . . . . 154<br />

4.12 Abondances relatives des sous-unités en acclimatation couplée à l’hypoxie et à différentes<br />

salinités . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 157<br />

4.13 Effet de l’acclimatation en hypoxie sur la composition en sous-unités . . . . . . . . . 158<br />

4.14 Sites de prélévement des populations estuariennes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 160<br />

4.15 Profil SEC-MALLS de l’hémolymphe d’un crabe du Pont Eon . . . . . . . . . . . . 162<br />

4.16 Profil SEC-MALLS de l’hémolymphe d’un crabe du Pont de la Corde . . . . . . . . 163

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