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168 CHAPITRE 4. PLASTICITÉ PHÉNOTYPIQUE DE L’HC DE C. MAENAS 4.6.4 Conclusion et perspective Aucun effet de la salinité plus faible de l’estuaire n’a pu être observé sur la structure de l’Hc. Les populations présentes étaient des populations jeunes, que l’on trouve préférentiellement dans ces milieux en raison de la pression de prédation moindre. Les cycles de mue rapides que subissent ces jeunes individus rajoutent un changement dans la présence de la cryptocyanine, de structure proche de l’Hc mais sans fonction de transport de l’oxygène, et qui complique l’interprétation des données obtenues. Il serait intéressant de pouvoir réitérer ces travaux en se basant sur une population de crabes adultes vivant dans un milieu estuarien. Il existe des populations de C. maenas adultes vivant dans l’estuaire du Guillec, à l’ouest de Roscoff, dans le sédiment meuble des berges. Des suivis de cette population et une acclimatation à l’eau de mer sont envisageables. Du point de vue développemental, il pourrait également être intéressant de travailler sur les premiers stades de développement de C. maenas. Il a été montré chez Cancer magister que la composition de l’Hc varie au cours du développement de l’animal entre la larve mégalope, les mues juvéniles et l’adulte et que les différents complexes ont des propriétés différentes (Terwilliger et Brown, 1993). Une expérience sur une cohorte de crabes élevées au laboratoire permettrait de vérifier si cela est aussi le cas chez C. maenas Enfin, les échantillons de ces expériences n’ont pas été analysés en spectrométrie de masse. Un examen attentif des gels natifs avant et après stabulation suggère qu’il pourrait exister une légère différence de stoichiométrie entre les trois sous-unités rapides, celle migrant le moins rapidement semblant être un peu moins abondante par rapport aux deux autres après stabulation. Une quantification relative en ESI-MS permettrait de vérifier si cette différence est réelle ou non. 4.7 Bilan général et perspectives Carcinus maenas est un crabe supportant des modifications rapides et importantes des conditions de son environnement (estran) ainsi qu’une vie prolongée dans les estuaires (juvéniles notamment). Ces capacités lui ont permis de se répandre dans de nombreuses zones côtières en dehors de son aire de répartition naturelle et font de lui une espèce invasive dans beaucoup de zones littorales. D’un point de vue physiologique, la plasticité phénotypique ne semble pas impliquée dans l’adaptation à court terme à l’hypoxie ou dans l’adaptation à l’hyposalinité. En revanche, elle semble impliquée dans des réponses à plus long terme (6 jours dans nos expériences) qui sortent du cadre du milieu intertidal. La réponse phénotypique observée en hypoxie longue correspond à une abondance plus élevée d’une sous-unité sensible au L-lactate et pourrait donc avoir des conséquences fonction-

4.7. BILAN GÉNÉRAL ET PERSPECTIVES 169 nelles sur le transport de l’oxygène. Les hypoxies rencontrées dans le milieu naturel sont plus courtes et correspondent davantage aux expériences d’oxygénation variable qui n’ont pas induit de changement phénotypique. Il peut être suggéré que le coût métabolique d’un ajustement du pH ou de la concentration en effecteurs dans l’hémolymphe est moindre pour une réponse à court terme par rapport à un changement de production de protéines. De plus, ces réponses hémolymphatiques peuvent être mises en route très rapidement (quelques heures). Le basculement vers une réponse phénotypique peut refléter l’avantage à long terme de posséder un pigment intrinséquement plus adapté aux conditions et permettant de relâcher la pression physiologique sur la régulation de la composition de l’hémolymphe. Pour étayer ces hypothèses, une étude détaillée des propriétés fonctionnelles de ces pigments est nécessaire. Une expérience d’acclimatation longue à une hypoxie sévère, en réalisant des prélèvements quotidiens pour suivre les concentrations en effecteurs et le pH hémolymphatique ainsi que la composition et les propriétés des pigments constituerait la prochaine étape de l’étude de la plasticité phénotypique de l’Hc. En ce qui concerne les populations naturelles, le suivi dans la rivière Penzé n’a pas révélé de changements de composition en sous-unité en relation avec la salinité du milieu. L’ESI-MS pourrait permettre de confirmer ces résultats, de préférence en choississant une population de crabes adultes présentant moins d’interférence avec les protéines hémolymphatiques impliquées dans la mue. Un suivi saisonnier d’une population marine naturelle serait également intéressant afin de vérifier si la plasticité phénotypique peut être impliquée dans des adaptations à long terme dans le milieu naturel (cycle de température annuel). D’un point de vue méthodologique, ces études nous ont permis de vérifier la pertinence de l’emploi de la spectrométrie de masse pour le phénotypage de nos individus. Même si l’équipement nécessaire est moins facilement accessible et si moins d’analyses peuvent être réalisées que par des analyses de routine type PAGE, la qualité des données recueillies, la possibilité de quantifier les abondances de manière relative et d’appliquer des méthodes statistiques aux résultats en font une méthode de choix pour étudier les variations de faible amplitude dans l’expression de protéines proches en masse.

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nelles sur le transport de l’oxygène. Les hypoxies rencontrées dans le milieu naturel sont plus courtes<br />

et correspondent davantage aux expériences d’oxygénation variable qui n’ont pas induit de changement<br />

phénotypique. Il peut être suggéré que le coût métabolique d’un ajustement du pH ou de la<br />

concentration en effecteurs dans l’hémolymphe est moindre pour une réponse à court terme par rapport<br />

à un changement de production de protéines. De plus, ces réponses hémolymphatiques peuvent<br />

être mises en route très rapidement (quelques heures). Le basculement vers une réponse phénotypique<br />

peut refléter l’avantage à long terme de posséder un pigment intrinséquement plus adapté aux<br />

conditions et permettant de relâcher la pression physiologique sur la régulation de la composition de<br />

l’hémolymphe.<br />

Pour étayer ces hypothèses, une étude détaillée des propriétés fonctionnelles de ces pigments est<br />

nécessaire. Une expérience d’acclimatation longue à une hypoxie sévère, en réalisant des prélèvements<br />

quotidiens pour suivre les concentrations en effecteurs et le pH hémolymphatique ainsi que la<br />

composition et les propriétés des pigments constituerait la prochaine étape de l’étude de la plasticité<br />

phénotypique de l’Hc.<br />

En ce qui concerne les populations naturelles, le suivi dans la rivière Penzé n’a pas révélé de<br />

changements de composition en sous-unité en relation avec la salinité du milieu. L’ESI-MS pourrait<br />

permettre de confirmer ces résultats, de préférence en choississant une population de crabes adultes<br />

présentant moins d’interférence avec les protéines hémolymphatiques impliquées dans la mue. Un<br />

suivi saisonnier d’une population marine naturelle serait également intéressant afin de vérifier si la<br />

plasticité phénotypique peut être impliquée dans des adaptations à long terme dans le milieu naturel<br />

(cycle de température annuel).<br />

D’un point de vue méthodologique, ces études nous ont permis de vérifier la pertinence de l’emploi<br />

de la spectrométrie de masse pour le phénotypage de nos individus. Même si l’équipement nécessaire<br />

est moins facilement accessible et si moins d’analyses peuvent être réalisées que par des analyses<br />

de routine type PAGE, la qualité des données recueillies, la possibilité de quantifier les abondances de<br />

manière relative et d’appliquer des méthodes statistiques aux résultats en font une méthode de choix<br />

pour étudier les variations de faible amplitude dans l’expression de protéines proches en masse.

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