maenas (intertidal zone) and Segonzacia mesatlantica - Station ...

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Dénaturant Natif FIG. 4.18 – Profils PAGE dénaturant et natif de complexes purifiés après stabulation. D et H, fractions dodécamérique et hexamérique. Les pourcentages indiqués correspondent à la proportion d’hexamère non-fonctionnel présente dans l’hémolympe (en tenant compte des dodécamères et des hexamères fonctionnels).
4.6. ETUDE 3 : ÉTUDE D’UNE POPULATION NATURELLE ESTUARIENNE 167 4.6.3 Discussion Les deux populations échantillonnées à différentes salinités présentent avant stabulation des profils SEC-MALLS qui différent par la présence d’un complexe n’absorbant pas à 337 nm chez les individus du site le plus hyposalin (Pont Eon, en amont). Ce complexe élue en même temps que les hexamères fonctionnels d’Hc et il est constitué de monomères séparables de l’Hc en gel natif ; sa masse native est environ de 518,2 kDa, soit 86 kDa par monomère. Cette valeur est cohérente avec la migration de cette sous-unité spécifique avec les sous-unités d’Hc les plus lentes en gel dénaturant. Cette sousunité est absente des échantillons possédant uniquement de l’Hc fonctionnelle. Il ne s’agit donc pas d’apo-Hc car la migration très différente en gel natif indique une structure primaire différente des autres sous-unités fonctionnelles. Ce complexe peut être proposé comme étant de la cryptocyanine. Ce complexe appartient à la famille de l’Hc et est un hexamère de structure semblable à l’Hc. Il est vraisemblablement en relation avec les cycles de mue (Terwilliger et al., 2005). Du point de vue de l’Hc fonctionnelle, les deux populations ne différent ni par l’abondance des complexes ni par la composition en sous-unités telle qu’elle est observée en gel PAGE, que ce soit avant ou après stabulation. Ces résultats suggèrent l’absence d’expression spécifique de certaines sous-unités d’Hc selon les conditions de salinité du milieu dans cette population estuarienne. En revanche, l’abondance de la cryptocyanine varie au cours de l’expérience. Ces variations se répercutent sur les concentrations en protéines totales, qui est élevée chez les crabes du Pont Eon avant stabulation. Avant stabulation, ces crabes présentent clairement de la cryptocyanine alors qu’elle est peu présente chez les crabes du site en aval. Après trois semaines en stabulation, les crabes du site amont présentent toujours la cryptocyanine mais elle est également observée, avec des abondances plus faibles, chez les crabes du site en aval. Les crabes collectés étaient de petite taille et de nombreuses mues ont été constatées dans les aquariums, ce qui indique que ces individus subissent des cycles de mues rapprochés. La cryptocyanine est impliquée dans les mécanismes ayant lieu à la mue et sa présence peut être le reflet de cet état physiologique. Les individus prélevés au Pont de la Corde étaient un peu plus gros, ce qui pourrait expliquer qu’un seul crabe sur 4 présentait de la cryptocyanine avant stabulation. Le fait que les niveaux de cryptocyanine augmentent après stabulation est peut-être le signe d’un déclenchement du cycle de mue par la mise en eau normosaline. Les masses des hexamères déterminées à partir des données de MALLS correspondent relativement bien aux masses obtenues en spectrométrie de masse supramoléculaire pour un échantillon présentant deux distributions de pics donnant des masses de 449 809 Da et 486 572 Da. La cryptocyanine pourrait donc être un hexamère de 486 kDa formé de sous-unités de 81 kDa environ.
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THESE DE DOCTORAT DE L’UNIVERSITE
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i Résumé / Abstract Réponse adap
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iv SOMMAIRE 4.2 Objectifs de l’é
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102 CHAPITRE 2. ESI-MS ET MALLS APP
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104 CHAPITRE 3. STRUCTURE DE L’HC
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216 CHAPITRE 6. CONCLUSION ET PERSP
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Annexe B Détermination des distrib
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TABLE DES MATIÈRES 263 Table des m
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