maenas (intertidal zone) and Segonzacia mesatlantica - Station ...

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144 CHAPITRE 4. PLASTICITÉ PHÉNOTYPIQUE DE L’HC DE C. MAENAS FIG. 4.3 – Biplot de l’effet de la salinité sur l’abondances des différents complexes. L’analyse a été réalisée avec un seul facteur explicatif (salinité) ; le deuxième axe correspond aux résidus. Les variables descriptives sont en rouge. Les points ouverts sont les crabes acclimatés à l’hyposalinité, les points fermés sont ceux acclimatés en hypersalinité. FIG. 4.4 – PAGE natif sur hémolymphe de crabes acclimatés à différentes salinités. Trois bandes sont toujours présentes (en bas) et une n’est présente que chez 2 individus (bande notée *). Les accolades désignent les bandes attribuées aux complexes non-dissociés.
4.4. ETUDE 2 : EFFET DE LA SALINITÉ ET DE L’OXYGÉNATION 145 4.5 Etude n°2 : Acclimatation à différentes salinités et oxygénation en laboratoire 4.5.1 Démarche expérimentale Collecte et acclimatation des crabes à différentes conditions Des crabes mâles adultes Carcinus maenas ont été capturés par des nasses appâtées disposées à marée basse sur l’estran en face de la Station Biologique de Roscoff et récupérées le lendemain. Ces crabes ont été gardés une journée en aquarium d’eau de mer courante avant d’être transférés dans les aquariums expérimentaux d’acclimatation. Trois expériences ont été réalisées (les valeus de n correspondent au nombre de crabes survivants à la fin de l’acclimatation) : a) une expérience à trois salinités différentes, en normoxie, pendant 20 jours (n=21) ; b) une expérience en normoxie et en oxygénation variable, à salinité constante, pendant 10 jours (n=12) ; c) une expérience associant différentes salinités et une hypoxie progressive, pendant 13 jours (n=10). Le suivi des conditions d’acclimatation est présenté dans la figure 4.5. Les échantillons d’hémolymphe ont été prélevés avant et après acclimatation de manière appariée pour chaque crabe. Pendant toute la durée des expériences, les crabes étaient nourris régulièrement au chinchard ou à l’arénicole. Analyse des échantillons Les échantillons ont été analysés par SEC-MALLS, par gel SDS-PAGE et PAGE natif et par ESI-MS. Les protéines ont également été dosées. Les proportions de dodécamères et d’hexamères ont été mesurées sur les profils à 280 nm lorsqu’ils étaient identiques à ceux à 337 nm en raison du meilleur rapport signal/bruit. Pour certains échantillons présentant des hexamères non-fonctionnels (cryptocyanine, voir partie suivante), les proportions ont été mesurées sur le profil à 337 nm afin de toujours obtenir les proportions de complexes fonctionnels.
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THESE DE DOCTORAT DE L’UNIVERSITE
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i Résumé / Abstract Réponse adap
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