maenas (intertidal zone) and Segonzacia mesatlantica - Station ...

4.4. ETUDE 1 : EXPÉRIENCE PRÉLIMINAIRE (ACCL. SALINITÉ) 141
en pics gaussiens révèlent un autre composé probablement hexamérique : une déconvolution à 4 pics
ne permet pas de reconstituer correctement le signal alors qu’une déconvolution à 5 pics est correcte
(figure 4.2a,b). Le pic d’hexamère est alors visiblement constituté de 2 pics proches.
Les profils obtenus varient selon les conditions d’acclimatation des crabes : les agrégats et les
produits de dissociation sont plus abondants dans les échantillons hypersalins. Une analyse RDA à un
facteur (salinité) montre que l’effet de l’acclimatation est statistiquement significatif sur les aires des
différents pics à 337 nm (R 2 =0,46 ; p-value=0,009) (figure 4.3). L’abondance des dodécamères et des
hexamères classiques est plus importante dans les échantillons hyposalins et le pic supplémentaire et
les agrégats sont plus abondants dans les échantillons hypersalins.
Composition en sous-unités par PAGE
Afin de vérifier si les différences observées au niveau de l’abondance des différents complexes est
corrélée avec des composition en sous-unités différentes, les échantillons ont été analysés en PAGE
natif (figure 4.4). Trois bandes sont présentes chez tous les individus ; une bande est présente chez
un individu de chaque condition. A part cette bande, aucune différence marquée de profil PAGE n’est
observée entre les deux conditions d’acclimatation.
4.4.3 Discussion
L’hémolymphe décongelée comporte une fraction dodécamèrique et 3 fractions hexamériques de
masse proche. Les hexamères présents doivent différer dans leur conformation puisqu’ils éluent à des
temps différents, ce qui peut être dû à des rayons hydrodynamiques différents ou des interactions
différentes avec la matrice.
La salinité d’acclimatation a un effet sur les proportions des complexes. Cet effet peut être direct
(changement de la composition en sous-unités chez le crabe) ou indirect (conservation différente
d’une même structure pendant la congélation). D’après les profils PAGE, la composition en sousunités
ne différe pas d’une condition à l’autre. Il est donc probable que la différence de salinité qui
résulte en une osmolarité différente de l’hémolymphe agit sur les proportions des complexes par une
conservation différente à -80°C selon la force ionique de l’hémolymphe des crabes.
Cette expérience préliminaire ne montre donc pas de changement du profil de sous-unités après
3 semaines d’acclimatation à différentes salinités. Cependant, il est également possible que des sousunités
migrent au même endroit sur le gel et que certaines soient ainsi "masquées". L’usage de la
spectrométrie de masse dans l’étude suivante permet de résoudre ce problème.