maenas (intertidal zone) and Segonzacia mesatlantica - Station ...

3.1. PROBLÉMATIQUE ET OBJECTIFS DE L’ÉTUDE 105
FIG. 3.1 – Structure du L-lactate. Le L-lactate est asymétrique au niveau du carbone central (*). Sa
masse molaire est de 90 g.mol −1 et son pKa à 25°C, 100 kPa est de 3,85. Il est donc présent sous
forme d’ion lactate à pH physiologique.
latus (Sanna et al., 2004)). Un effet lactate inverse a même été observé chez une espèce terrestre, Gecarcoidea
natalis (Adamczewska et Morris, 1998). La diminution de la sensibilité au lactate semble
corrélée avec le passage à un mode de vie plus terrestre et à la ventilation aérienne (Morris et Bridges,
1994, Bridges, 2001).
Des expériences avec des analogues du L-lactate et l’absence d’effet du D-lactate suggèrent que
le L-lactate se lie de manière stéréospécifique à un site de l’hémocyanine (Johnson et al., 1988) et
que la liaison se fait par l’intermédiaire des 4 positions autour du carbone chiral (Graham, 1985). Des
expériences de calorimétrie (ITC, Isothermal Titration Calorimetry) réalisées sur des hémocyanines
sensibles et insensibles au L-lactate ont montré que les hémocyanines insensibles ne liaient pas le
L-lactate, contrairement aux hémocyanines sensibles (Taylor et al., 2000).
Pour l’hémocyanine du crabe bleu Callinectes sapidus, des titrations du lactate donnent une valeur
de constante de dissociation du lactate de 1,8 mM pour l’état oxygéné et 2,2 sites de fixation
par hexamère, et des mesures par ultrafiltration donnent une valeur de 3,2 mM pour la constante de
dissociation et 2,8 sites par hexamère (Johnson et al., 1984). Pour l’hémocyanine de la langouste Panulirus
interruptus, une purification des sous-unités et la formation d’homohexamères sensibles ou
insensibles a montré que la sensibilité au lactate dépend des sous-unités présentes (Johnson et al.,
1987). L’analyse des courbes de dissociation de l’oxygène montre chez cette espèce la présence d’environ
un site de fixation seulement par homohexamère et non six, ce qui suggère que le site n’est pas
localisé sur une seule sous-unité mais émergerait de l’association des sous-unité en structure quaternaire
(figure 3.2(c)) (Johnson et al., 1987). Pour l’hémocyanine du homard Homarus vulgaris, des
expériences d’ultrafiltration et de dialyse à l’équilibre en utilisant des ligands marqués ont montré la
présence d’environ 2 sites de fixation du lactate par dodécamère, ce qui est en accord avec les données
obtenues pour Panulirus interruptus. L’urate aurait autant de site de fixation mais les sites de fixation
du lactate et de l’urate seraient distincts et indépendants (Nies et al., 1992). Le lactate ne se lie pas de