Test rapide OnSite FOB (25ng/ml) (échantillon ... - MD Doctors Direct

Test rapide OnSite FOB (25ng/ml) (échantillon de selles)
Référence R2011C
Diagnostic In Vitro
USAGE PREVU
Le test OnSite FOB est un test rapide qualitatif immuno-chromatographique à
lecture visuelle pour la détection de l’hémoglobine humaine dans les selles.
Ce test doit apporter une aide au diagnostic dans le cadre de troubles gastrointestinaux,
par exemple, les diverticules, colites, polypes et le cancer
colorectal. Les test FOB utilisé pour la recherche du sang occulte fécal est
recommandé pour une utilisation dans le cadre :
1) d’examens physiques de routine,
2) des tests de routine hospitalière,
3) le dépistage du cancer colorectal ou de saignements gastro-intestinaux de
n'importe quelle source.
Ce test est destiné à un usage professionnel.
RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST
L'American Cancer Society et les Centers for Disease Control ont
recommandés un test de recherche de sang occulte dans les selles par an
après 50 ans pour aider à la détection précoce du cancer colorectal (1) Deux
types de tests sont disponibles dans le commerce: 1.) Gaïac, 2)
l'immunochimie.
Le test de gaïac est largement utilisé mais il manque de précision. Le test de
gaïac est un composé de phénolique naturel pouvant être oxydé en quinone
par l'activité des peroxydases d'hydrogène de hHb avec un changement de
couleur détectable. La sensibilité et la spécificité des tests de gaïac sont
beaucoup plus faibles que ceux des tests immunochimiques. Le manque de
précision du test de gaïac est lié aux peroxydases alimentaires, et à
l'hémoglobine contenue dans la viande, les fruits crus et les légumes. Des
saignements gastro- intestinaux non cancéreux et l'apport en fer peuvent
également causer des résultats faussement positifs avec le test de gaïac (2).
Le test rapide OnSite FOB est conçu pour détecter spécifiquement de faibles
niveaux de sang occulte dans les selles humaines. Il est très précis pour
l'hémoglobine humaine (hHb) par rapport aux méthodes de gaïac. Les
résultats des tests rapides immunochimiques FOB ne sont pas affectés par
les peroxydases alimentaires, par le sang animal et l'acide ascorbique. Une
étude japonaise a démontré que les tests de dépistage immunochimiques
FOB réduisent la mortalité du cancer colorectal de 60% (3).
PRINCIPE DU TEST
Le test rapide OnSite FOB test est basé sur la technique sandwich
immunochromatographique à flux latéral. La cassette test se compose de: 1)
un tampon conjugué de couleur bordeaux contenant des anticorps
monoclonaux anti- hHb conjugués à l'or colloïdal (anti-hHb conjugués) et 2)
une membrane de nitrocellulose contenant une bande test (bande T) et une
bande contrôle (bande C). La bande T est pré-coaté d'un autre anticorps
monoclonal anti-hHb, et la bande C est pré-coatée d’anticorps IgG de chèvre
dirigés contre des anti-souris.
Quand un volume adéquat d'échantillon est déposé dans le puits échantillon de
la cassette, l'échantillon migre par capillarité à travers la cassette. Si de
l’hémoglobine est présente dans l'échantillon pour une concentration supérieure
ou égale à 25ng/mL, l’hHb va se lier à des conjugués anti-hHb.
L'immunocomplexe est ensuite capturé sur la membrane par l'anticorps précoaté,
formant une couleur bordeaux dans la zone de la bande T, indiquant un
résultat de test positif. L’absence de cette bande indique que la concentration
d’hHb dans l'échantillon est en dessous du seuil de détection, cela indique un
résultat négatif.
L’absence de la bande T suggère un résultat négatif. Le test contient un
contrôle interne (bande C) qui doit présenter une bande de couleur bordeaux de
l'immunocomplexe IgG de chèvre anti-souris / conjugué IgG-or colloïdal
indépendamment du développement de la couleur sur la bande T. Sinon, le
résultat du test est invalide et l'échantillon doit être retesté avec une autre
cassette.
REACTIFS ET MATERIELS FOURNIS
1. Chaque kit contient 25 dispositifs de test, chacun scellé dans un sachet avec
deux articles à l’intérieur : a. Une cassette b. Un dessicant
2. 25 tubes d’extraction, contenant chacun 1ml de solution d’extraction.
3. Une notice technique
MATERIELS POUVANT ENTRE REQUIS MAIS
NON FOURNIS
1. Contrôle positif
2. Contrôle négatif
MATERIELS REQUIS NON FOURNIS
1. Chronomètre
2. Récipient propre pour le recueil d’échantillon de selles
PRECAUTIONS D’UTILISATION
Pour un usage de Diagnostic In Vitro
1. Cette notice technique d’utilisation doit être lue entièrement avant de réaliser le
test. Le non respect des procédures indiquées dans ce manuel peut conduire
à de mauvais résultats.
2. Ne pas ouvrir les sachets scellés à moins d’être prêt à réaliser le test.
3. Ne pas utiliser des dispositifs périmés.
4. Ne pas utiliser les composants de tout autre type de kit de test comme un
substitut pour les composants de ce kit.
5. Mettre tous les réactifs à température ambiante (15 à 30°C) avant l’utilisation.
6. Ne pas pelleter l’échantillon de selles parce que ça peut causer un excès
qui peut amener une coagulation dans le puits d’échantillon et peut nuire
à son migration.
7. Ne pas utiliser des échantillons de selles avec du sang visible pour les
essais
8. Porter des vêtements de protection et des gants jetables lors de la
manipulation des réactifs du kit et des échantillons cliniques. Se laver les
mains soigneusement après avoir réalisé le test.
9. Les utilisateurs de ce test doivent suivre les précautions universelles d’États-
Unis CDC en matière de biosécurité.
10. Ne pas fumer, boire ou manger dans les zones où les échantillons ou les
réactifs sont manipulés.
11. Le tampon d'extraction contient du NaN3 0,1%. Eviter le contact avec la peau
ou les yeux. Ne pas ingérer.
12. Eliminer tous les échantillons et le matériel utilisé pour le test comme déchets
biologiques.
13. Les résultats des tests doivent être lus dans les 10 minutes après que
l’échantillon est été distribué sur le puits de l’échantillon ou sur la bande de
l’échantillon du dispositif. Une lecture après 10 minutes pourrait donner des
résultats erronés.
14. Ne pas effectuer le test dans une pièce avec une forte ventilation ou
climatisation.
PREPARATION DES REACTIFS ET CONSIGNES POUR LA
CONSERVATION
Tous les réactifs sont prêts à l’emploi tels que fournis. Conserver les dispositifs de
test non utilisés et non ouverts entre 2 et 30°C. Les contrôles positifs et négatifs
doivent être conservés entre 2 et 8°C. Si le dispositif a été conservé entre 2 et
8°C, s’assurer qu’il atteigne la température ambiante avant l’ouverture. Le
dispositif de test est stable jusqu’à la date d’expiration imprimée sur le sachet
scellé. . Ne pas exposer les kits à des températures supérieures à 30°C. Ne pas
congeler le kit.
PREPARATION PATIENT
1. L’échantillon doit être collecté chez des patients ayant :
• Saignements menstruels
• Hémorroïdes saignantes
• Saignements de constipation
• Saignements urinaires
2. Des restrictions diététiques ne sont pas nécessaires.
3. L’alcool et certaines substances médicamenteuses comme l’aspirine,
l'indométacine, la phénylbutazone réserpine, corticostéroïdes et les antiinflammatoires
non stéroïdiens peuvent causer des irritations gastro- intestinales
et des saignements, cela pouvant provoquer des faux- positifs. Sur les conseils
du médecin, ces médicaments pourraient être temporairement interrompus
pendant 7 jours avant et pendant la période d'essai.
RECOLTE DES ECHANTILLONS ET MANUPULATION
Considérer tous les échantillons d’origine humaine comme potentiellement
infectieux et les éliminer selon les procédures de biosecurité.
1. Collecter un échantillon de selles dans un récipient propre.
2. Dévisser le capuchon du tube de prélèvement et retirer l’applicateur de tube.
3. Collecter l’échantillon de selles en utilisant le bâton de prélèvement. Prendre
des échantillons de selles à cinq (5) endroits différents de l’échantillon. Ne pas
pelleter l’échantillon de selles.
4. Retirer l'excès d'échantillon de la tige cannelée et de l’extérieure des rainures.
Soyez sûr que l'échantillon reste dans l’intérieur des rainures.
5. Réinsérer le bâton de prélèvement dans le tube, et serer fermement.
6. Secouez vigoureusement le tube d'extraction.
L’échantillon est maintenant prêt pour le test, le transport ou le stockage.
Note L’échantillons prélevés peuvent être conservés pendant 3 (trois) jours au
réfrigérateur entre 2°C et 8°C ou 1 (un) an à ≤ -20°C.
1

PROCEDURE D’ANALYSE
1. Le test, les échantillons patients, et les contrôles doivent être amenés à
température ambiante avant le test.
2. Retirez le dispositif de test de cassette de sa pochette de protection. Placer
le test sur une surface propre et plane.
3. Secouer soigneusement le tube de collecte afin d’assurer un bon mélange de
l’échantillon de selles dans la solution d’extraction.
4. Tenir le tube en position verticale. Dévisser le capuchon de protection.
Distribuer 2 gouttes de solution dans le puits témoin ("S"). Ne pas trop
charger les échantillons.
.
5. Démarrer le chronomètre.
6. Attendre 10 minutes et lire le résultat. Un positif fort peut être observé en 1
minute.
Ne pas interpréter après 10 minutes. Pour éviter toute confusion, jeter le
dispositif de test aprés l’interprétation du résultat.
CONTRÔLE DE QUALITÉ
OnSite FOB cassettes Hi test rapide tel que décrit dans la procédure d'essai cidessus,
exécutez 1 contrôle positif et 1 contrôle négatif (fourni sur demande)
dans les circonstances suivantes afin de surveiller les performances du test:
1. Un opérateur nouvelle utilise le kit, avant d'effectuer l'essai de spécimens.
2. Kit de test nouvelle est utilisé.
3. Une nouvelle expédition de trousses est utilisé.
4. La température utilisée au cours du stockage du kit tombe en dehors de 2°C -
30°C.
5. La température de la zone d'essai tombe en dehors de 15°C -30°C.
INTERPRETATION DES RESULTATS
1. Négatif. Une bande de couleur rose apparaît dans la zone de contrôle ("C"),
sans bande dans la zone test ("T"). Un résultat négatif indique que l’échantillon
contient moins de 25ng hHb/ml de solution d’extraction.
Test rapide OnSite FOB (25ng/ml) (échantillon de selles)
10 minutes
Results
Effet Hook Ou Effet Prozone
Onsite FOB Hi Rapid Test cassettes ne montrent pas d'effet Hook ou d’effet de
prozone jusqu'à une concentration de 0.5 mg hHb/ml solution tampon.
Reproductibilite
Des échantillons positifs connus ont été analysés dans des études
multicentriques et de la même manière, des résultats positifs ont été observés. De
même, les échantillons négatifs connus ont produit des résultats négatifs une fois
examinés dans des analyses multiples.
Performance Clinique
Un total de 251 échantillons ont été prélevés depuis 2 hôpitaux et testé par FOB
OnSite FOB Hi Rapid test et par un test FOB commerciale de premier plan. Une
comparaison pour tous les échantillons est montrée dans le tableau suivant:
Onsite FOB Hi Rapid Test
Référence
Test Positif Negatif Totale
Positif 76 0 76
Negatif 2 173 175
Totale 78 173 251
Sensibilité relative: 100.0%, Spécificité relative: 98.8%, accord globale: 99.2%.
LIMITES DU TEST
1. Le test et l'interprétation des résultats doivent être suivis de près lors du test de
recherche de sang occulte dans les selles. Ne pas suivre la procédure peut
donner des résultats inexacts.
2. Le test OnSite FOB est conçu pour un usage d’aide diagnostique aux examens
physiques, et n'est pas prévu pour remplacer d'autres procédures de diagnostic
telles que le fibroscope G.I., l'endoscopie, la coloscopie, ou l'analyse par rayons
X. Des résultats tests ne devraient pas être considérés comme concluants en ce
qui concerne la présence ou l'absence de désordres gastro-intestinaux. Un
résultat positif doit être suivi par d'autres procédures de diagnostic pour
déterminer la cause exacte et la source pour la recherche de sang occulte dans
les selles.
3. Un résultat négatif peut être obtenu même si un trouble gastro-intestinal est
présent. En outre, parce que beaucoup de lésions locales, comme certains
polypes et cancers colorectaux, peuvent saigner par intermittence ou pas du tout,
le sang occulte fécal ne peut être uniformément distribué dans tout un échantillon
fécal.
RÉFÉRENCES
1. America Cancer Society, Inc. Cancer Reference Information: Can Colon and
Rectum Cancer be Found Early? (Online) Available: http://www.cancer.org
2. Allison JB, Takawa IS, Ransom LJ, Adrian AL. A comparison of fecal occult
blood tests for colorectal –cancer screening. N. Eng. J. Med. 1996; 334:155-159.
3. Saito H. Screening for colorectal cancer by immunochemical fecal occult
blood testing (Review). Jpn J. Cancer Res 1996; 87:1011-1024.
2. Positif. Deux bandes de couleur rose apparaissent : une dans la zone du
test ("T") et une dans la zone de contrôle ("C"). Un résultat positif indique que le
l’échantillon contient 25ng hHb/ml de solution d’extraction ou 25 µg hHb/g de
selle ou plus.
Index of CE Symbols
Se
Réservé à
Utilisé
reporter à la
un usage de
par
notice
diagnostic in
d’utilisation
vitro
Référence Numéro de lot
REF N Tests
par kit
Conserver
entre +2 et
+30°C
Fabricant
Représentant
autorisé
Date de
fabrication
Ne pas
réutiliser
Les échantillons positifs doivent être confirmés avec une méthode alternative et
la décision diagnostic doit être prise avec les données cliniques.
3. Ininterprétable. Aucune bande de couleur rose n’apparaît dans la zone de
contrôle ("C"), ou une bande apparaît dans la zone test ("T") mais pas dans la
zone de contrôle. Un résultat ininterprétable peut être dû à une mauvaise
procédure du test ou à la détérioration des réactifs. Répéter le test en utilisant
un nouveau test rapide.
Fabriqué par CTK Biotech, Inc.
10110 Mesa Rim Road
San Diego, CA 92121, USA
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Effective date: 2012-05-07
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PERFORMANCES
Sensibilité. La sensibilité analytique du test est de 25ng hHb/ml de solution
d’extraction ou 25µg hHb/g de selle.
Spécificité. Le test OnSite FOB est spécifique à l'hémoglobine humaine. Les
échantillons positifs et négatifs contenant les substances parasites suivantes
ont été examinés sans effet sur le résultat du test :
Substance
Concentration
Hémoglobine de poulet
100 µg /ml
Hémoglobine de porc
500 µg /ml
Hémoglobine de boeuf
500 µg /ml
Hémoglobine de chèvre
100 µg /ml
Hémoglobine de cheval
100 µg /ml
Hémoglobine de mouton
100 µg /ml
Hémoglobine du poisson
100 µg /ml
Hémoglobine du lapin
100 µg /ml
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