Rapport de Campagne - Station Biologique de Roscoff

Travaux réalisés
COMPTE RENDU DE CAMPAGNE A LA MER SUR UN NAVIRE Ifremer
Analyse in situ du fonctionnement du gène des métallothinéines
Des Bathymodiolus ont été prélevées sur le site 9°N à l'intérieur de cadres déposés sur les sites
Biovent (2 cadres), Mussel Bed (1 cadre) et East wall (1 cadre). L'utilisation du multipréleveur
permettra de définir les paramètres physico-chimiques du milieu environnant. pour chaque cadre
10 animaux ont été disséqués et stockés dans l'azote liquide. Les tissus ont été répartis entre R.
Cosson (dosage des métallothionéines), A. Fiala (dosage des métaux) et M. Laulier (gène des
métallothionéines).
Expériences d'intoxication à pression atmosphérique. Collaboration R. Cosson, A.
Fiala.Les animaux (Bathymodiolus) ont été exposés à cinq métaux: Ag: 20, Cd: 200, Cu:40, Hg:
20 et Zn: 1000 mg / L pendant une durée de 42 heures;
Expériences d'intoxication à 250 Bars dans IPOCAMP. Collaboration B. Shillito, R.
Cosson, A. Fiala.Le cadmium a été ajouté à l'eau de mer sous forme de Chlorure de Cadmium à
raison de 200 mg/L. Trois temps d'exposition (19, 42 et 45 heures) ont été menés à terme. Pour
chaque individu une partie des branchies et du manteau a éte prélevée et stockée dans l'azote
liquide.
Collection d'animaux en vue de la recherche de l'élément mobile "Mariner.Stockage à -
80°C, dans l'azote liquide ou en solution de préservation des ADN.
Collection de coquilles
Des coquilles de gastéropodes,de Bathymodiolus et de Calyptogena ont été collectées et stockées
à sec.
Extraction d'ARN.
Des essais ont été réalisés en nombre limité en raison du risque de pénurie d'azote.
Exploitation à terre
La recherche et le séquençage du gène des métallothionéines de Bathymodiolus sera entreprise à
partir du cDNA par la tecnique de PCR.Cette séquence sera utilisée comme sonde dans le but de
quantifier l'ARNm des métallothionéines. La comparaison quantitative de ces ARN permettra
d'étudier l'influence des conditions environnementales sur l'activité de synthèse des ARNm de
métallothionéines. La même démarche appliquée aux animaux "intoxiqués" expérimentalement
permettra d'analyser les mécanismes d'induction de ces ARN.
Recherche de l'élément mobile Mariner.
L'utilisation d'amorces synthétisées à partir de séquences conservées doit permettre la mise en
évidence puis la caractérisation moléculaire des éléments mobiles de type transposon. Leur
séquençage sera ensuite entrepris. La comparaison de ces séquences doit permettre d'établir les
homologies structurelles de ces éléments ou confirmer l'existence de nouvelles familles (travaux
en cours chez Riftia). Ce travail sera mené en collaboration avec Y. Bigot (Université de Tours)
Analyse des mécanismes de cristallisation chez les mollusques. L'étude de ces
mécanismes sera entrepris en collaboration avec D. Chateignier (Université du Maine). Les
spectres obtenus seront comparés à ceux d'animaux littoraux (travaux en cours).
Commentaires
Les travaux réalisés correspondent globalement à ceux initialement prévus.Seules les extractions
d'ARN ont été limitées en raison de la relative pénurie d'azote liquide.
L'utilisation d'IPOCAMP a démontré la faisabilité d'une analyse des mécanismes d'induction
dans des conditions plus proches des conditions naturelles au cours des expériences
d'intoxication.
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