Rapport de Campagne - Station Biologique de Roscoff

COMPTE RENDU DE CAMPAGNE A LA MER SUR UN NAVIRE Ifremer
H OP E 99
URM 7
Nom : HERVE
Prénom : Guy
Institution : CNRS et UPMC
Campagne : HOPE 99
Navire : L'ATALANTE - Submersible: NAUTILE
Organisme maître d'oeuvre : URM 7
Chef de mission : F. LALLIER
Seconde partie: du 27 avril au 22 mai 1999
Participants associés :
Françoise Gaill et Aline Fiala
Rappel des Objectifs
La participation de notre laboratoire à la campagne HOT 99 est basée sur notre programme
d'étude des aspects enzymologiques de la symbiose chez Riftia. L'analyse porte plus
particulièrement sur les enzymes des voies de biosynthèse des nucléotides pyrimidiques et de
l'arginine dans lesquelles intervient un métabolite commun instable, le carbamylphosphate.Le
travail effectué antérieurement et dont les résultats sont sous presse (Simon et al. Marine
Biology, 1999) avaient été obtenus en utilisant les échantillons receuillis et préparés lors de ma
participation à la Campagne HOT 96. Ces résultats montrent que les premiers enzymes de la
voie de biosynthèse des nucléotedes pyrimidiques ( carbamylphosphate synthétase-P et aspartate
transcarbamylase)ne sont décelables que dans le trophosome, alors que les premiers enzymes de
la voie de l'arginine sont présents dans toutes les parties et organes du vers testés. Cette première
partie du travail a également permis de montrer, en collaboration avec Françoise Gaill, que les
bactéries que nous avons purifiées à partir du trophosome sont morphologiquement quasiindiscernables
des bactéries telles qu'elles se présentent in situ au sein du trophosome.
Travaux réalisés
L'organisation du programme des plongées m'a été tout à fait favorable puisque j'ai pu
bénéficier d'un ou de plusieurs échantillons de Riftia à l'issue de la plupart de ces plongées. De
plus, le travail réalisé n'a pu l'être que grâce à la présence à bord d'une centrifugeuse
thermostatée. Ceci m'a permis d'effectuer les échantillonages et préparations suivantes:
1°-Préparations de la bactérie symbiote par centrifugation des extraits trophosomaux en
gradients de Percoll. En vue des différents usages qui seront fait de ces bactéries elles sont
conservées dans plusieurs types de conditions (milieu salin, tampon de conservation des
Bactéries, tampon utilisé pour les tests enzymatiques).
2°-Gradients analytiques, effectués dans les mêmes conditions mais dont toutes les fractions
sont receuillies pour l'étude de la répartition des différens enzymes dans les différentes fractions
du trophosome.
3°- Séparation des différents organes et tissus pour l'étude de la répartition:
a/-des enzymes suivants de la voie de biosynthèse des pyrimidines afin de mettre en évidence
l'éventuelle implication partagée et spécifique des enzymes de l'un et l'autre des deux organismes.
b/-des enzymes de la voie de synthèse de novo des nucléotides pyrimidiques qui permettent la
resynthèse partielle de ces nucléotides à partir des produits de dégradation des acides nucléiques.
4°-Substrats pour les essais d'eventuelle mise en culture du symbiote. La mise en culture du
symbiote est peut-être impossible. Encore faut-il avoir tenté de l'obtenir dans les conditions
simples les plus susceptibles de permettre leur développements. Des extraits de trophosomes en
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