Analyse des mélanges complexes de volatils issus des végétaux.

PARTIE II : LES METHODES D’ANALYSE DES MELANGES
COMPLEXES DE VOLATILS
tel-00803254, version 1 - 21 Mar 2013
L’analyse d’un mélange complexe volatil s’effectue classiquement par le couplage « en
ligne » d’une technique chromatographique, généralement la CPG, avec une technique
d’identification spectrale, généralement la spectrométrie de masse (SM) ou, quelques fois, la
Spectrométrie Infrarouge par Transformée de Fourier (IRTF). Cette procédure est privilégiée
lors de la réalisation d’analyse « de routine » d’un échantillon dont les constituants ne
présentent pas de difficultés d’identification (27, 29). Dès lors que l’étape d’identification se
complexifie, la procédure nécessite un fractionnement de l’échantillon par chromatographie
sur colonne (CLC), qui peut se poursuivre jusqu’à la purification d’un constituant par
distillation fractionnée ou par des techniques chromatographiques préparatives. L’objectif
étant d’aboutir à son élucidation structurale par les techniques spectroscopiques usuelles :
Résonance Magnétique Nucléaire du proton (RMN- 1 H) et du carbone-13 (RMN- 13 C), SM, IR,
etc…
Au laboratoire CPN, l’identification des constituants d’une huile essentielle ou de la
fraction volatile extraite d’une matrice d’origine végétale est réalisée par des techniques
d’analyses conventionnelles. La maîtrise de ces techniques chromatographiques a nécessité un
investissement personnel qui passe par leur utilisation, leur adaptation et leur
perfectionnement, mais surtout par la mise en œuvre d’une méthodologie d’analyse
rigoureuse. Celle-ci est basée sur l’utilisation conjointe de la CPG/Ir et de la CPG/SM-IE
(figure 1).
Le mélange complexe volatil (fractionné ou non dans le cas d’huile essentielle) est analysé
simultanément par CPG/Ir et CPG/SM-IE. Le calcul des Ir, polaires et apolaires, et la
quantification des composés s’effectuent par CPG/Ir. L’analyse par CPG/SM permet d’obtenir
les spectres de masse des divers constituants qui, à l’aide d’un logiciel, sont ensuite comparés
à ceux répertoriés dans des bibliothèques, l’une élaborée au laboratoire et les autres,
commerciales, en éditions traditionnelles ou informatisées [Jennings et Shibamoto (114)
Joulain (115, 116), Wiley (117, 118), Adams (110), Nist (120)]. Afin de rendre performante
l’identification, il est préconisé de posséder une bibliothèque riche mais surtout adaptée au
domaine d’investigation (27). La bibliothèque « Arômes » construite au laboratoire, est
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