4 - Bibliothèques de l'Université de Lorraine

Après chaque lavage, les cellules sont récupérées par centrifugation
à 15000 tours par mn pendant 1 mn et refroidies à 4 Oc puis lysées
dans un bai n réfrigéré de NaPi à Ph 8 avec EDTA et 20
microgrammes/ml de phénylméthylsulfonyl fluoride (PM5f).
Après 5 mn à O°C, les stromas sont récupérés par centrifugation à
15000 tours/mn pendant 10 mn, le surnageant est récupéré par
aspiration. Les membranes sont mises en suspension dans 150 dl de
PB5 et incubées pendant une heure à 37°C, à nouveau centrifugées
pendant 10 mn à 18000 tours/mn et le dernier surnageant est
récupéré. Les mesures donnent une courbe définissant un T t pour la
fragmentation qui est une mesure de stabilité de membranes:
T 1/2 pour Er =Er 0/2. Un T t bas est un test simple et définitif
pour le diagnostic d'anomalie du cytosquelette. Ce test peut détecter
des anomalies pour des globules rouges d'apparence normale.
(3) Ektacytométrie à oxygène (50)(59)
Plusieurs laboratoires ont réalisé des modifications de leur
ektacytomètre pour contrôler la pression en oxygène dans le
viscosimètre afin d'étudier la déformabilité des cellules
pathologiques. En
effet, la déformabilité d'érythrocytes normaux
n'est pas affectée par des variations de P02. (62)(63)
Des modifications techniques ont été nécessaires pour générer et
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