4 - Bibliothèques de l'Université de Lorraine

obtenir par d'autres méthodes. Elle représente un des grands
intérêts de l'ektacytométrie.
De fortes contraintes de cisaillements (1300/1500 dyn/m2) sont
nécessaires pour fragmenter les érythrocytes.
Lors de différentes études, il était apparu que la viscosité interne
cellulaire était principalement déterminée par les CCHM et que pour
un stress donné l'élongation de la cellule était différente selon la
CCHM. De cette façon, la CCHM modifie la stabilité intrinsèque de la
membrane sur le temps de fragmentation.
Des trois facteurs déterminant la flexibilité de l'érythrocyte, deux
sont réduits à des niveaux négligeables par le processus:
- du fait d'un moindre contenu en hémoglobine des stromas, leur
viscosité interne est très basse
- le rapport surface/volume étant élevé, on diminue l'effet de ce
facteur sur la déformabilité.
Comme soluté, on utilise un polymère avec un index de réfraction
élevé et une viscosité appropriée (on utilise le Dextran T40 à des
concentrations de 30 à 40 1'0 ou encore du 5tractan). (60)
La mesure de viscosité de toutes les solutions utilisées par
l'ektacytomètre, doit être faite avant et celle-ci doit être ajustée
aux valeurs données par la procédure décrite par HEALTH et
collaborateurs. (61) Les leucocytes sont éliminés par passage du sang
à travers une colonne en cellulose. Les érythrocytes sont lavés 30
fois dans une solution saline et phosphatée à température ambiante.
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