4 - Bibliothèques de l'Université de Lorraine

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obtenir par d'autres méthodes. Elle représente un des grands intérêts de l'ektacytométrie. De fortes contraintes de cisaillements (1300/1500 dyn/m2) sont nécessaires pour fragmenter les érythrocytes. Lors de différentes études, il était apparu que la viscosité interne cellulaire était principalement déterminée par les CCHM et que pour un stress donné l'élongation de la cellule était différente selon la CCHM. De cette façon, la CCHM modifie la stabilité intrinsèque de la membrane sur le temps de fragmentation. Des trois facteurs déterminant la flexibilité de l'érythrocyte, deux sont réduits à des niveaux négligeables par le processus: - du fait d'un moindre contenu en hémoglobine des stromas, leur viscosité interne est très basse - le rapport surface/volume étant élevé, on diminue l'effet de ce facteur sur la déformabilité. Comme soluté, on utilise un polymère avec un index de réfraction élevé et une viscosité appropriée (on utilise le Dextran T40 à des concentrations de 30 à 40 1'0 ou encore du 5tractan). (60) La mesure de viscosité de toutes les solutions utilisées par l'ektacytomètre, doit être faite avant et celle-ci doit être ajustée aux valeurs données par la procédure décrite par HEALTH et collaborateurs. (61) Les leucocytes sont éliminés par passage du sang à travers une colonne en cellulose. Les érythrocytes sont lavés 30 fois dans une solution saline et phosphatée à température ambiante. 67
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