4 - Bibliothèques de l'Université de Lorraine

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Une méthode quantitative directe des protéines membranaires par RIA peut également être effectuée. (48) Cette technique semble plus sensible quand elle est réalisée sur des patients splénectomisés. (49) i) Etude de la déformabilité : ektacytomètre L'ektacytométrie a été mise au point lors de la collaboration entre Marcel BESSIS et Narla MOHANDAS à l'institut de pathologie cellulaire à Paris en 1974 et 1975. (50)(51)(52)(53)(54) Il s'agissait d'une combinaison de techniques de rhéologie faite à partir de précédentes observations de TZANCK et BESSIS en 1947. (55) Ces observations montraient que la mesure des axes de courbure des GR pouvait être faite par des méthodes de diffraction. Au début, elle était appliquée sur des globules rouges déshydratés dans différents types d'anémies hémolytiques. (53)(54) Les plus importantes avancées techniques ont été réalisées par ces mêmes auteurs en collaboration avec des scientifiques du Technicom Instruments en mettant au point un automate d'analyse d'images (Groner et collaborateurs en 1980). (56) (1) Ektacytométrie à gradient osmotique (57) Il s'agit de la méthode la plus fiable pour le diagnostic des sphérocytoses quel que soit l'âge du patient et les formes les plus 60

énignes de la maladie. (58)(59) Ce test permet d'étudier la déformabilité érythrocytaire en fonction de l'osmolalité du milieu, déformabilité qui est fonction de 3 paramètres que sont: - la surface cellulaire - le rapport surface/volume - l'état d'hydratation de la cellule. L'ektacytomètre est un viscosimètre de Couett transparent dans lequel les érythrocytes en solution sont soumis à des forces de cisai lIement. Cette déformation est analysée par diffractométrie d'un rayon laser. L'image observée est circulaire au repos, devient ovale lorsque les cellules sont en mouvement. Le rapport de son petit axe sur grand axe définit une valeur arbitraire appelée Index de Déformabilité (ID) ou index d'élongation (IE). Le test consiste à mesurer l'ID pour des osmolalités croissantes. Lorsque l'on exprime l'ID en fonction de l'osmolalité on obtient une courbe en forme de cloche permettant de définir trois indices: - l'ID en isotonie ID max reflet de la surface cellulaire pour une valeur 0 max, voisine de l'isotonie. - la valeur de l'osmolalité en hypotonie pour laquelle l'ID s'annule donnant la valeur 0 mi n. - la valeur de l'osmolalité en hypertonie pour laquelle l'ID maximum chute de moitié donnant la valeur 0'. La valeur 0 ' est un reflet du rapport de la surface par rapport au volume de la cellule. Elle doit être voisine voire la même que la 61

énignes <strong>de</strong> la maladie. (58)(59) Ce test permet d'étudier la<br />

déformabilité érythrocytaire en fonction <strong>de</strong> l'osmolalité du milieu,<br />

déformabilité qui est fonction <strong>de</strong> 3 paramètres que sont:<br />

- la surface cellulaire<br />

- le rapport surface/volume<br />

- l'état d'hydratation <strong>de</strong> la cellule.<br />

L'ektacytomètre est un viscosimètre <strong>de</strong> Couett transparent dans<br />

lequel les érythrocytes en solution sont soumis à <strong>de</strong>s forces <strong>de</strong><br />

cisai lIement. Cette déformation est analysée par diffractométrie<br />

d'un rayon laser. L'image observée est circulaire au repos, <strong>de</strong>vient<br />

ovale lorsque les cellules sont en mouvement. Le rapport <strong>de</strong> son petit<br />

axe sur grand axe définit une valeur arbitraire appelée In<strong>de</strong>x <strong>de</strong><br />

Déformabilité (ID) ou in<strong>de</strong>x d'élongation (IE). Le test consiste à<br />

mesurer l'ID pour <strong>de</strong>s osmolalités croissantes. Lorsque l'on exprime<br />

l'ID en fonction <strong>de</strong> l'osmolalité on obtient une courbe en forme <strong>de</strong><br />

cloche permettant <strong>de</strong> définir trois indices:<br />

- l'ID en isotonie ID max reflet <strong>de</strong> la surface cellulaire pour une<br />

valeur 0 max, voisine <strong>de</strong> l'isotonie.<br />

- la valeur <strong>de</strong> l'osmolalité en hypotonie pour laquelle l'ID s'annule<br />

donnant la valeur 0 mi n.<br />

- la valeur <strong>de</strong> l'osmolalité en hypertonie pour laquelle l'ID maximum<br />

chute <strong>de</strong> moitié donnant la valeur 0'.<br />

La valeur 0 ' est un reflet du rapport <strong>de</strong> la surface par rapport au<br />

volume <strong>de</strong> la cellule. Elle doit être voisine voire la même que la<br />

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