4 - Bibliothèques de l'Université de Lorraine

Après avoir mis les échanti lions en suspension dans des solutions
d'osmolarité décroissante, après centrifugation et après 30 mn
d'incubation à 20 oC, on mesure le pourcentage d'hémoglobine en
solution par la densité optique à 540 nanomètres du surnageant.
De
nombreuses variances techniques existent portant soit sur la
préparation des solutions de NaCl, soit sur l'appréciation de
l'hémolyse. Les résultats sont exprimés (3) :
- en concentration saline pour laquelle l'hémolyse a commencé
(hémolyse initiale). Pour un sujet sain, la valeur normale est de 5 0/00.
- en concentration sali ne pour laquelle l'hémolyse est complète
(hémolyse totale). Pour un sujet sain, la valeur normale est de 3 0/00'
Un autre mode d'expression des résultats obtenus consiste à tracer
la courbe d'hémolyse en fonction des concentrations salines. On se
réfère aux concentrations responsables d'une hémolyse à 10 10, 50 %
et 90 10. On compare aux valeurs du témoin.
L'hémolyse à 50 10 se produira pour des solutions plus concentrées, on
observera donc une déviation vers la droite de la courbe du patient
par rapport à la courbe témoi n.
Par ailleurs, il existe une corrélation entre la sévérité des manifestations
cliniques et l'augmentation de la fragilité osmotique. (37)
Le test peut être négatif ou douteux dans 20 à 30 % des cas dans les
formes bénignes de la sphérocytose héréditaire et chez le nouveauné.
(38) Chez ce dernier, la sensibilité du test de résistance
globulaire osmotique (RGO) avant incubation est diminuée, car les
48