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3. Recherche des anticor~ a) EID (150)(200) Même méthode que décrite plus haut, mais ce sont les anticorps présents dans le sérum qui sont recherchés. La dilution maximale d'anticorps donnant un précipité permet d'évaluer par référence à des témoins, la concentration d'anticorps. Cette technique est peu sensible et il faut 2 prélèvements pour montrer une séroconversion et des titres élevés d'anticorps. b) Méthode RadioImmunologique RIA (150) ou méthode MACRIA : M. Antibody Capture RadioImmuno Assay (201) Elle se passe en trois étapes: - on fixe sur des billes en polystyrène des anticorps antiIgM et on les met en contact avec le sérum à tester (on recherche des IgM antiparvovi rus). - après lavage, on additionne l'antigène des Parvovirus. - après un nouveau lavage, on additionne des IgG antiparvovirus marqués à l'iode 125. Après un troisième lavage, on dose la radioactivité. 156
C'est une technique qui permet de déceler la présence d'IgG spécifique au Parvovirus B19 signant une infection récente. Elle est fiable et un seul prélèvement est suffisant. c) Méthode ImmunoEnzymatique (EUSA) Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay (202) Le principe est identique à la méthode RIA. Elle est basée sur l'immunocapture des IgM ou IgG du sérum à tester par un anticorps antichaîne MU (ou a pour les IgG). L'antigène B19 est mis en contact avec les IgM ou les IgG. Leur interaction est détectée par l'addition successive d'un anticorps monoclonal antiB19 et d'immunoglobulines antisouris marquées par la peroxydase. L'activité enzymatique est le plus souvent révélée par une technique colorimétrique. Ces techniques sont préférentiellement utilisées dans certaines situations: - Eruption atypique ou arthralgie chez l'enfant ou la femme enceinte. - 10-15 jours après contage chez une femme enceinte. - Bilan d'anasarque foeto-placentaire. - Bilan d'anémie chronique ou aiguë chez un sujet immunodéprimé. Remarque : chez le fœtus et les sujets immunodéprimés, il faut impérativement associer à ces méthodes un diagnostic par PCR (car il ya un défaut d'immunoglobulines M). 157
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