THS-6596.pdf
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Bases pair<br />
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13<br />
Figure 43 : Produits obtenus après amplification par les amorces AMY 1V et AMY IR<br />
Ligne 1 et 13: ADN standard IDND III. 2: Lactobacillus amylovorus LTH 503, 3:<br />
Lactobacillus amylovorus TMW 1.88, 4: Lactobacillus amylovorus TMW 1.88, 5 :<br />
Lactobacillus amylophilus, 6: 691(Lysat enzymatique d'ADN), 7 : 691 (Ultrasonat d'ADN), 8:<br />
E.coli HB101, 9: ADN E.coli HBI0l(Amyl+), 10 : ADN E.coli HBI0l, 11 : Plasmide E.coli<br />
HB101(Amyl+), 12: Plasmide E.coli HB101(Amyl+).<br />
Des ADN de souches sans pouvoir amylolytique ont été également testées, certaines de<br />
ces souches peuvent donner des fragments d'ADN lorsque la température d'hybridation est<br />
basse. C'est le cas des souches Lac/obacillus plan/arum LTH 1.25 et 206. Ces fragments sont<br />
de taille beaucoup plus grande que ceux obtenus avec les souches amylase positives. Par<br />
ailleurs, lorsqu'on augmente la température d'hybridation de 3°C les souches Lac/obacillus<br />
plan/arum LTH 1.25 et 206 ne donnent plus de fragment. Ce résultat nous permet de<br />
considérer les amorces AMY 1V et AMY IR comme étant spécifiques pour certains gènes<br />
d'amylase.<br />
Séquence de l'amplificat isolé par peR.<br />
1COO TTC AAA CTT CAC CTG TTA ATG AAG TTA AAG TTG GAA ATA GCG GGT CTA AGT CAT TAA<br />
61ATA ACT OOT ATT GGC TAT ATC AGC CAA CTA AAT ATA GTA TTG GTA ACT AIT ATT TAG GAA<br />
121COO AAG CTG AAT TTA AGT CAA TGT GCG CTG CTG CTA AAG AAT ATA ATA TCA GGA TCA TTG<br />
181TCG ACG CAA CTC TGA ATG ATA CAA CAA GTG AIT ATA GTG CAA TTT CGG ATG AAA TTA AAA<br />
UIGTA TTC CAA ATT GGA CAC ATG GTA ACA AAC MA TTT CGA ATT GGA GTG ATC GTG AAG ATG<br />
JOITTA CTC AAA ATT CGT TGT TAG GTT TAT ATG ATT OOA ATA CTA AAA ATT CTC AAG TTC AAG<br />
36lTTC AGA CGT ATT TGA AGA ATT ATT TGG AAC GCT TGA TIT CTG ACG GAG CTT CAG GCT TTC<br />
421GTT ATG ATG CAG CTA AGC ATA TTG MC TTC CAA GTC MT ATG ATG GCA GCT ATG GCA GCA<br />
48lATT TCT GGC CAA ATA TTA CTG ATA ATG GGT CTG MT TTC AGT ATG GTG MG TIT TGC AGG<br />
S41ACT CGA TTT CM MG AAT CAG ATT ATG CTA ATT ACA TGA GTG TTA CAG CTT CAA ATT ACG<br />
60lGCA ATA CGA TTC GCA ATG CGT TM AGG ATC GTG ATT TTA CCG CM GTA CTT TGC AGA ATT<br />
66lTCA ACA TCA GTG TTC CAG CTT CTA MT TAG TM CTT GOG TCG AAT CGC ATG ATA ATT ATG<br />
nlCTA ACG ATG ATC MG TIT CGA CTT GGA TGA ATA ATA GTG ATA TTA MT TAG GCT GOG CTG<br />
78lTTG TTG CIT CGC GTT CTG GTA GTG TTC CGC TGT TCT TTG ACC GTC CAG TTG ATG GTG GTA<br />
84IATG GTA CTC GGT TCC CTG GCA GTT CAG AAA TTG GTG ATG CTG GCA GCA GTT TGT ATT ATG<br />
90lATA MG CAG TTG TAG CTG TTA ATA MT TCC ATA ATG CAA TGG CTG GTC AAT CTG<br />
Figure 44: séquence de l'amplificat obtenu avec Gluconobacter sp. 018. Les symboles sont<br />
les mêmes que ceux sur la figure 17.<br />
./<br />
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