THS-6596.pdf

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Le plasmide recombinant (vecteur pSU 1) à été isolé de ces souches E. coli HB 101
amylase positive (figure 41).
Bases paires
3530
4268
5148; 4973 '
21226
Figure 41 : Electrophorèse de l'ADN du plasmide isolé à partir d'un clone
E. coli HE 101 amylase positive (Lignes 2 et 3). Ligne 1= HIND III.
3.1.4 Amplification et Isolement d'un fragment de gène d'amylase par peR
La production d'amplificats avec les amorces AMY 1V et AMY 1R est testée sur des
ADN (génomiques et plasmidiques) provenant de clones amylase positive et de souches
utilisées comme référence. Les produits obtenus sont photographiés après électrophorése sur
gel d'agarose. Lactobacillus amy!ovorus LTH 503 et une souche de Lactobaci/!us
amy!ophilu.... ont été testés, au préalable, pour vérifier la spécificité des amorces AMY l V et
AMY IR. Les ADN des souches Lactobacillus amy!ovorus LTH 503 et Lactobacillus
amylophilus sont amplifiées par les amorces AMY 1V et AMY 1R. La taille des fragments
obtenus est d'environ 1000 bp (figure 42).
Bases paires
21226
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Figure 42: Produits obtenus après amplification par les amorces AMY 1V et AMY IR
Ligne 1 et 12 : ADN standard HIND III. 2: Lactobacilfus casei 235, 3 : Lactobaciffus brevis
BI, 4: Lactobaciffus curvatus 266, 5:Staphylococcus sp 291, 6: souche 244, 7 :
Gluconobacter sp., 8 : souche 266, 9 : Lactobacilfus fermentum 273, 10 : souche 229, 11 :
Lactobaciffusfermentum 282.
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