THS-6596.pdf

Bases paires
3530
4268
5148;4973
2 3
Figure 39: Electrophorèse des fragments d'ADN de taille comprise entre 1114 bp
et 4268 bp (Lignes 2). Lignes let 3 : ADN standard Hind II etVIII respectivement.
3.1.3 Ligation de l'ADN avec pSUl et transformation de E.coli HBI01.
L'ADN de Paenibacillus sp. 691 est ligué au vecteur pSUl. Ces vecteurs pSU1+ADN
de Paenibacillus sp. 691 vont servir à la transformation de E coli HE101. Les souches E coli
HE101 ayant reçu le vecteur pSU1 deviennent résistantes à l'ampicil1ine. Il ne restera alors
qu'à tester l'activité amylolitique des cellules Ecoli HB101 sur milieu solide contenant
l'amidon comme unique substrat carboné avec l'ampicilline comme agent sélectif.
Recherche de clone E. coli HBlOl Amylase positive
Plus de 500 colonies E coli HE 101 transformées avec le vecteur pSU1 plus ADN
Paenibacillus sp. 691 sont testées. Une colonie positive a été détectée.
Figure 40 : Photo de clones après croissance (48H d'incubation à 37°C) sur milieu sélectif
pour tester l'activité amylolytique. La flèche indique une colonie positive détectée grâce à la
présence d'un halo clair (virage au jaune du pourpre de bromocrésol) autour de la colonie.
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