THS-6596.pdf
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2.7 Additifs<br />
2.7.1 La catalase<br />
La catalase est une peroxydase qui décompose l'eau oxygénée en eau et en oxygène. L'eau<br />
oxygénée est un produit de la chaîne respiratoire chez les bactéries aérobies. Elle est<br />
toxique, son accumulation dans le milieu de culture inhibe la croissance des bactéries<br />
dépourvues de catalase. L'addition de la catalase au milieu BSM permet la destruction de<br />
l'eau oxygénée susceptible d'interférer sur les résultats.<br />
La catalase est mise en solution dans de l'eau distillée. Cette solution est stérilisée par<br />
filtration et ajoutée au milieu de culture après autoclavage et refroidissement à SO°e.<br />
L'addition de catalase et la faible concentration en glucose dans ce milieu permettent<br />
d'éviter respectivement une éventuelle intluence de l'eau oxygénée, ou d'acides issus du<br />
métabolisme, sur la croissance de la souche test.<br />
2.7.2 Les antibiotiques<br />
Les solutions d'antibiotiques sont stérilisées par filtration et conservées à -20°e. Elles ne<br />
seront décongelées et additionnées aux milieux de culture qu'après autoclavage et<br />
refroidissement à SO°e.<br />
l'actidione (cycloheximide)<br />
l'actidione bloque la réaction de translocation au niveau des ribosomes des cellules<br />
eucaryotes; dans les milieux de culture elle inhibe la croissance d'un grand nombre de<br />
champignons non pathogènes qui sont souvent isolés à partir de produits alimentaires. Son<br />
addition dans le milieu MRS permet un meilleur isolement des souches bactériennes.<br />
Le chloramphenicol<br />
Le chloramphenicol est un antibiotique relativement thermostable, à large spectre<br />
antibactérien. Il bloque la réaction de la peptidyltransférase ribosomale chez les<br />
procaryotes. Il est utilisé pour faciliter l'isolement des levures et autres champignons.<br />
L'ampicilline<br />
L'ampicilline est utilisée dans le milieu LB pour empêcher la croissance des souches E.coli<br />
n'ayant pas reçu le vecteur pSU!.<br />
2.7.3 Les indicateurs colorés<br />
Les indicateurs colorés sont stérilisés avec les milieux de culture.<br />
Le rouge de phénol<br />
Le rouge de phénol est un indicateur de pH très sensible utilisés pour la fermentation des<br />
hydrates de carbone. Le changement de coloration, virage du jaune au rouge indique une<br />
variation du pH de 8,4 à 6,8.<br />
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