CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

été réalisés (1 à 10 UFC/ml) (UFC : Unité Formant Colonie) afin de reproduire les
contaminations habituellement rencontrées dans les industries alimentaires.
A partir de cryobilles stockée à -80°C, les souches bactériennes ont été mises en culture dans
de l’EPT (18/24h à 37°C). Afin de s’assurer de la pureté des souches, un isolement du tube
EPT a été réalisé sur gélose SMAC. Après croissance, une colonie a été inoculée dans un tube
EPT (18/24h à 37°C). Une série de dilution au 1/10ème a ensuite été effectuée dans des tubes
de TS. Cette gamme de dilution a été utilisée pour contaminer artificiellement les matrices
alimentaires aux taux voulus. Afin de connaître la quantité exacte de bactéries ensemencées,
pour chaque gamme de dilution, un dénombrement a été réalisé sur géloses nutritives
(Trypticase Soja Agar (TSA)). Dans le but d’éviter des biais de manipulation, les inoculations
artificielles ont été réalisées de manière aléatoire et en triplicata (Figure 25).
Par ailleurs, chaque matrice ensemencée a été stockée à +4°C toute une nuit afin de mimer ce
que subissent les souches dans les entreprises agroalimentaires.
Figure 25 : Protocole d’inoculation des matrices
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