CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

Figure 17 : Projet de normalisation : protocole de recherche des STEC appartenant aux sérogroupes O157,
O111, O26, O103 et O145.
5. L’étape de confirmation
L’ensemble des tests cités précédemment permet seulement de donner un résultat présomptif
sur la présence de STEC dans la prise d’essai analysée. Après un résultat positif que ce soit
avec une méthode immunologique ou encore génétique, il est toujours obligatoire de réaliser
une confirmation de ce résultat. Cette étape passe entre autre par l’isolement et l’identification
de la bactérie cible recherchée (sérogroupe, flagelles, présence des facteurs de virulence…).
Pour les souches E. coli O157, il existe deux méthodes d’isolement validées: l’IMS et le
VIDAS ICE. Pour les STEC non-O157, seule l’IMS existe.
L’IMS pour Immuno Séparation Magnétique permet de rechercher et d’isoler les E. coli
appartenant aux 5 sérogroupes (reconnus pathogènes par l’AFSSA) présentes dans le bouillon
d’enrichissement.
Le principe de ces différentes méthodes est détaillé dans les paragraphes suivants.
5.1. L’immuno-séparation magnétique (IMS)
La séparation immuno-magnétique (IMS) reprise dans la norme ISO EN 16654 est une
méthode qui utilise des particules paramagnétiques couvertes d'anticorps spécifiques de
l'organisme cible, ajoutées à l'échantillon d'aliment à analyser. L'organisme cible est capturé à
la surface des particules magnétiques qui sont isolées de l’échantillon par application d'un
aimant. En lavant puis diluant les cellules cibles ainsi isolées dans un volume inférieur à celui
duquel elles proviennent, un effet de concentration des cellules bactériennes est obtenu et
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