CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

Figure 16 : Projet de normalisation d’une méthode de recherche des STEC appartenant aux sérogroupes O157,
O111, O26, O103 et O145.
Ce protocole repose sur deux grandes étapes : le dépistage puis la confirmation (Figure 17).
L’étape de dépistage consiste en un enrichissement puis à la détection dans le bouillon en
premier lieu des facteurs de virulence (eae et stx) par une technique de PCR en temps réel et
si l’échantillon est positif pour ces deux cibles alors on recherchera par PCR également s’il y
a présence ou non d’un ou plusieurs des 5 sérogroupes. Les amorces et sondes utilisées sont
celles publiées par Perelle et al. (2004,2005) et Nielsen et al. (2003).
Si l’un des 5 sérogroupes est détecté, on passera à l’étape de confirmation qui consiste en une
immunoconcentration bactérienne puis à un isolement sur géloses. Si des colonies
caractéristiques apparaissent, alors il faudra confirmer que ces colonies appartiennent bien au
sérogroupe suspecté et les caractériser.
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