CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

Figure 10 : Les automates d’extraction d’acides nucléiques EASYMAG de bioMérieux (à
gauche) et EZ1 d’Applied Biosystems (à droite).
□ L’amplification d’ADN
Dans un souci de clarté, le paragraphe suivant sera articulé de la manière suivante. La
première partie expliquera le principe général d’amplification d’ADN grâce à une méthode
appelé la « Polymérase Chain Reaction » ou PCR. La deuxième partie mettra en évidence les
différentes manières de révéler les produits de PCR. Enfin, la dernière partie traitera des
différents types d’automates capables de réaliser une PCR. Dans cette partie, une précision
sera apportée sur les kits validés pour la recherche d’E. coli O157.
Le principe de la PCR
La « Polymérase Chain Reaction » ou PCR est une technique de réplication ciblée in vitro.
Elle permet grâce à une enzyme spécifique d’obtenir, à partir d’un échantillon complexe
(gras, protéine, paroi bactérienne, ADN, ARN…) d’importantes quantités d’un fragment
d’ADN spécifique et de longueur définie. (Poitras et Houde, 2002).
La révélation des produits de PCR :
La mise en évidence des produits de PCR peut avoir lieu après l’étape d’amplification, il
s’agit alors de la PCR en point final ou traditionnelle. Cependant, il existe depuis quelques
années des techniques beaucoup plus rapides de détection des amplicons. En effet, leur
détection est réalisée en même temps que les cycles de la PCR, il s’agit alors de RT-PCR
(PCR en temps réel) que nous avons utilisé tout au long de nos études.
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