CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

sur les E. coli cibles, eux mêmes fixés sur la protéine de phage ou l’anticorps de la paroi du
cône. De nouvelles étapes de lavage éliminent le conjugué non fixé. Lors de l'étape finale de
révélation, le substrat (4-Méthylombelliferyl phosphate) est aspiré puis refoulé dans le cône ;
l'enzyme du conjugué catalyse la réaction d'hydrolyse de ce substrat en un produit (4-
Méthylumbelliferone) dont la fluorescence émise est mesurée à 450 nm.
A la fin du test, les résultats sont analysés automatiquement par l’instrument qui fournit une
valeur de test pour chaque échantillon. Cette valeur est comparée à des références internes
(seuils) et chaque résultat est interprété (positif, négatif).
Figure 9 : Principe du VIDAS
A l’heure actuelle, la société de bioMérieux® commercialise trois kits de détection des
STEC :
Le kit VIDAS ECO : permet la détection de E. coli O157
Le kit VIDAS EES : permet la détection concomitamment d’E. coli O157 et E. coli
O26. Pour la capture des bactéries cibles, les deux kits ci-dessus utilisent des anticorps.
Le kit VIDAS UP E. coli O157 including H7 permet la détection spécifique des E. coli
O157. Ce dernier est basé sur une technologie utilisant des protéines recombinantes de queue
de phage.
L’ensemble des systèmes décrits précédemment (systèmes en microplaques, en une étape ou
automatisés) permet aux industriels de l’agroalimentaire un contrôle "présomptif" de la
présence de E. coli O157:H7 dans les aliments analysés. En effet, les kits décrits
précédemment ne recherchent que l’antigène somatique O157 (parfois associé à l’antigène
H7). Même les systèmes qui affichent une spécificité totale pour E. coli O157:H7 donnent en
fait des résultats positifs pour des E. coli O157 non-H7. Un résultat positif de l’un de ces tests
immunologiques signe seulement la présence de l’antigène cible (le plus souvent, il s’agit de
l’antigène somatique O157). Or, les réactions immunologiques croisées avec des espèces
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