CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

Systèmes immuno-chromatographiques
Ces méthodes immunologiques en une étape donnent un résultat en 15 minutes. La
préparation de l’échantillon et les phases d’enrichissement varient d’un kit immunologique à
l’autre mais s’inspirent souvent des recommandations formulées par la FDA (Food and Drug
Administration, USA). Les méthodes immunologiques en "une étape" sont très employées par
les industriels du fait de leur rapidité d’exécution et de leur simplicité. En effet, les étapes de
lavage-rinçage et d’addition de plusieurs réactifs ne sont pas nécessaires avec ces kits. Une
grande partie de ces systèmes est basée sur le principe d’immuno-chromatographie. Le
dispositif consiste en un support plastique contenant une membrane imprégnée de particules
d’or ou de latex recouverte d’anticorps spécifiques d’E. coli O157:H7 (i.e. O157 et
éventuellement H7), un puits pour l’échantillon et une fenêtre de test et de contrôle.
Un aliquote du bouillon d’enrichissement (généralement 100 µl) est placée dans le puit
destiné à l’échantillon alimentaire puis diffuse le long de la membrane jusqu’à la zone test
contenant l’anticorps anti-O157 par exemple. L’apparition d’une ligne colorée dans la fenêtre
test, après 10 à 20 minutes, indique un résultat positif signant la présence probable de E. coli
O157 dans l’aliment. On peut citer en exemple le test « VIP EHEC » (BioControl, Montesson,
France), validé par l’Association of Official Agricultural Chemists (AOAC) (Figure 7). Ce
test permet, après un enrichissement de 18h (8h pour la matrice steak haché), de visualiser (en
10 minutes) si un échantillon donné est contaminé ou non par E. coli O157. Notons que ces
tests ne sont pas validés ISO ou AFNOR.
Figure 7 : Test VIP EHEC
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