CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

le caractère sélectif vis-à-vis de O157:H7. Ainsi, Okrend et al. (1990), Tesh et al., (1991) ont
montré que l'addition de 5 bromo-4 chloro-indoxy-β-D-glucuronide (BCIG) ajouté à raison de
0,1 g.L-1 à une gélose SMAC favorise l'isolement de E. coli O157 inoculé volontairement
dans des échantillons de viande de boeuf. En effet, le BCIG permet de différencier les
colonies β-glucuronidase positives de celles qui sont négatives sur ce milieu. E. coli O157:H7
présente des colonies sorbitol négatives et β-glucuronidase négatives ; ces colonies restent
blanches alors que les colonies sorbitol négatives et β-glucuronidases positives virent au vert
ou au bleu. L'ajout du BCIG à la gélose SMAC réduit par conséquent le nombre de faux
positifs de 36 % par rapport à la simple utilisation du SMAC sans BCIG. En effet, E. coli
O157:H7 a pu être isolé à partir de 11 des 12 échantillons de viande inoculés utilisant le
SMAC-BCIG contre 8 sur 12 avec la seule utilisation du SMAC sans BCIG. Enfin, Zadik et
al., (1993) ont décrit l’intérêt d’ajouter du tellurite et de la céfixime à cette gélose SMAC
(CT-SMAC), étant donné des concentrations minimales inhibitrices (CMI) plus élevées pour
les STEC O157 que pour les autres E. coli et les bactéries sorbitol négatives comme
Aeromonas et Plesiomonas. Néanmoins, des souches de E. coli O157:H7 sensibles à certaines
concentrations de tellurite ont été décrites par Karch et al. (1996) et l’utilisation de la gélose
CT-SMAC dans ce cas précis s’avère inadaptée.
De plus, Thomson et al. (1990) ont développé un test rapide fluorescent pour la détection de
E. coli O157. Ce test utilise le 4-méthylumbelliféryl β-D-glucuronide (MUG) comme
indicateur hydrolysé en un composé fluorescent par l'enzyme β-glucuronidase (Rippey et al.,
1987).
De nombreux milieux chromogènes ont par ailleurs été mis au point comme par exemple les
milieux CHROMagar E. coli O157:H7 (CHROMagar) et O157:H7 ID (bioMérieux)
spécifiques du sérotype O157:H7. Ainsi les méthodes biochimiques sont intéressantes et
fondamentales pour la détection de E. coli O157:H7 mais restent inadaptées à la détection des
souches « mutantes » du sérotype O157:H7 et surtout à la détection des STEC non-O157:H7,
étant donné l’absence de propriété biochimique commune à tous les STEC.
Les méthodes immunologiques
Il existe actuellement sur le marché un grand nombre de tests permettant la détection de E.
coli O157:H7 dans les aliments et/ou dans les échantillons environnementaux. Ces systèmes
comprennent des tests conventionnels ELISA en microplaques, des systèmes immunologiques
en une étape et des systèmes complètement automatisés.
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