CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

Cette nouvelle méthode de concentration peut être comparée à celle de l’IMS parce qu’elle
repose sur le même principe. Toutefois, l’IMS n’immuno-concentre qu’un sérogroupe à la
fois alors que le VIDAS ESPT permet la concentration des 5 sérogroupes en même temps.
Cette nouvelle technique présente également l’avantage d’être automatisée.
Cette étude avait pour but de comparer les performances en termes de sensibilité et spécificité
du VIDAS ESPT et de l’IMS pour la recherche de faibles niveaux de STEC dans les aliments.
Pour la spécificité, le VIDAS ESPT et l’IMS ont montré des résultats semblables. Toutefois
après un VIDAS ESPT les géloses obtenues présentaient moins de flore annexe que celle
réalisées après un IMS. Néanmoins, notre étude a montré que la spécificité de ces méthodes
pourrait être améliorée par l’utilisation de géloses d’isolement plus sélectives et spécifiques.
Pourtant, à ce jour, il n’existe aucun milieu spécifique disponible pour les STEC non-O157.
La difficulté d’élaboration d’un tel milieu réside dans le fait que ces sérogroupes ont des
caractéristiques biochimiques et des besoins différents. Possé et al. (2008) a mis au point une
gélose permettant le développement et la différenciation des sérogroupes O26, O103, O111,
O145 et O157 à partir d’échantillons d’aliments ou de matières fécales.
Cette étude a également permis d’établir le seuil de sensibilité du VIDAS ESPT pour la
recherche des 5 sérogroupes de STEC. Celui-ci se situe aux environs de 10 3 UFC/mL dans les
bouillons de souches pures et 10 4 UFC/mL dans les échantillons de viandes de bœuf.
Une certaine variabilité des résultats a été observée entre les sérogroupes. De multiples
facteurs pourraient expliquer ce phénomène : d’une part, la composition des échantillons
(molécules de gras, flore annexe importante…) pourrait avoir un impact sur la liaison entre la
protéine de phage et la bactérie cible en la bloquant ; d’autre part, la liaison entre la protéine
de phage et la bactérie cible pourrait ne pas être suffisamment forte pour résister aux
différentes étapes du protocole du VIDAS ESPT. En effet, en dépit de la spécificité de ces
protéines de phage, il n’y a que peu ou pas d’informations concernant leur stabilité dans le
temps et leur résistance aux différents protocoles qui peuvent leur être appliqués.
De la même façon, la sensibilité de l’IMS pourrait être affectée par le taux de dilution de
l’enrichissement, mais aussi sa nature, et par les problèmes de spécificité des billes
magnétiques utilisées.
L’AFSSA préconise la recherche de 5 sérogroupes majeurs : O26, O103, O111, O145 et
O157. Le VIDAS ESPT et l’IMS permettent toutes deux la recherche de ces 5 sérogroupes.
Toutefois, le VIDAS ESPT permet de réaliser cette analyse en une fois alors que l’IMS
nécessite 5 tests. De plus, l’utilisation d’une méthode automatisée, type VIDAS, minimise les
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