CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

La comparaison des deux formats de cône a permis de mettre en évidence que les protéines de
phage ont une sensibilité meilleure ou égale à celle des anticorps. De plus, les expériences ont
permis de déterminer les concentrations optimales d’utilisation en protéines de phage de
chaque sérogroupe : de 0.3 à 1.25 µg/ml. A ces concentrations, les limites de détection par
concentration des bactéries sont comprises de 10 2 -10 3 UFC/ml en fonction du sérogroupe
(Tableau 14).
Concernant la spécificité de ces protéines de phage, elle est assez bonne puisque seulement le
Citrobacter en petite quantité est apparu sur les géloses et une des souches de E. coli non
spécifiques testées. Ces résultats se sont répétés pour toutes les protéines de phage testées sauf
celles ciblant les E. coli O157. Ce phénomène peut s’expliquer par le fait que ces souches
étaient extrêmement concentrées (≥ 10 8 UFC/mL).
Une fois les concentrations optimales définies et les tests de spécificité terminés, une nouvelle
série de cônes coatés avec les 5 types de phage a été fabriquée et évaluée au cours de mes
travaux.
3. Evaluation du nouveau test de concentration
3.1. Résumé
Escherichia coli O26, O103, O111, O145 et O157 sont les cinq sérogroupes majeurs définis
par l’AFSSA comme étant les plus souvent associés aux infections d’origine alimentaire. Les
contaminations par les E. coli entérohémorragiques (EHEC) sont la première cause
d’insuffisance rénale chez l’enfant. A l’origine des épidémies les plus connues, la viande de
bœuf hachée peu cuite est le plus souvent incriminée. Il est donc essentiel pour les industriels
de la filière d’avoir à leur disposition un protocole de détection efficace des 5 sérogroupes de
E. coli pointés du doigt.
L’objectif de cette étude était l’évaluation d’un nouveau test de concentration automatisé
(VIDAS ESPT). L’originalité de ce test repose sur l’utilisation de protéines recombinantes de
phage.
Dans un premier temps, la spécificité du cône au format 5 sérogroupes a été évaluée sur un
panel de 50 bouillons de cultures pures de E. coli O26, O103, O111, O145, O157, STEC et
non-STEC. La sensibilité des cônes a également été évaluée sur des cultures pures ou non de
E. coli. Puis ce nouveau test a été employé sur des matrices de viandes bovines
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