CHAPITRE 1 - Université de Bourgogne

6. L’IMS
La méthode standardisée ISO EN 16654 utilisant l’Immuno Séparation Magnétique (IMS) a
été réalisée à titre de comparaison avec les méthodes évaluées dans toutes les études menées.
Le protocole ISO repose sur une dilution de la prise d’essai au 1/10 ème dans le milieu
d’enrichissement du mTSB (bouillon trypticase soja modifié) contenant de la novobiocine à
une concentration de 20mg/L et enrichie pendant 24h à 41.5°C. Un aliquote de 1mL de
bouillon d’enrichissement est prélevé pour réaliser l’immuno-concentration.
L’immuno-concentration a été réalisée à l’aide de billes magnétiques de type Dynabeads
(Invitrogen®) selon les recommandations de l’industriel (Figure 29). Puis les billes ont été
étalées sur des géloses plus ou moins spécifiques à la bactérie ciblée. Après incubation des
géloses pendant 24 heures à 37°C, les colonies suspectes isolées ont été analysées grâce à
leurs caractéristiques biochimiques (galerie API 20E BioMérieux®) ainsi que des tests latex
ciblant l’antigène spécifique à la bactérie recherchée (Oxoid®) mais aussi en réalisant des
PCR sérogroupales sur un panel de colonies suspectes.
Figure 29 : Schéma de la réaction d’immuno séparation magnétique.
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