Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...

l’électrospray bénéficie d’une excellente résolution de l’ordre de 1 Da pour 10 000, d’une
grande sensibilité (de l’ordre de la picomole) et engendre peu de fragmentations.
Couplage spectrométrie de masse à d’autres techniques
La chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (CPG-SM)
constitue l’un des outils les plus puissants d’analyse de mélanges complexes de molécules
organiques ou biochimiques. Dans cette application on révèle le spectre des fractions au fur
et à mesure de leur sortie de la colonne de chromatographie. Cette technique est
classiquement utilisée pour l’analyse des séquences oligosaccharidiques par l’identification
des dérivés éthers méthyliques sous forme alditols ou méthyl-glycosides partiellement
méthylés et acétylés.
La spectrométrie de masse en tandem (SM-SM), qui consiste à coupler deux
spectromètres de masse, est également utilisée pour l’élucidation de mélanges
d’oligosaccharides. Dans cette technique, le premier spectromètre de masse sert à produire et
à séparer les ions moléculaires des différents composants du mélange et le second, à
fragmenter successivement ceux-ci et à enregistrer les spectres des ions parents
correspondants. La détermination complète de séquences oligosaccharidiques est alors
possible en combinant une technique d’ionisation FAB avec la spectrométrie de masse en
tandem. 153
I.3.2.d. Analyse et détermination structurale des polysaccharides
Une autre alternative à l’analyse structurale des polysaccharides en général, de GX en
particulier, est l’étude des molécules sous leur forme native. Dans ce cas, l’utilisation de la
spectroscopie RMN ( 1 H- et 13 C- RMN) va fournir des indications concernant la nature de la
chaîne principale, le taux de branchement par l’acide 4-O-méthylglucuronique ainsi que sur
l’importance et la position des groupes O-acétyle. Récemment, des études de RMN
bidimensionnelles homo- et hétéronucléaires de type COSY, TOCSY, HSQC ou NOESY ont
apporté des informations complémentaires qui permettent, sur la base de signaux
caractéristiques, l’identification des différentes structures de GX natifs.
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