Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...

Figure 43 : Principe du MALDI (d'après Karas et al., 152 )
Les complexes chargés ainsi formés sont accélérés et envoyés dans un tube de vol jusqu’au
détecteur. En général, la source MALDI est utilisée avec un analyseur à temps de vol (Time
Of Flight). Celui-ci est proportionnel à la racine carrée des rapports m/z. Outre sa grande
sensibilité (0,01 % à partir de moins d’un picomole de produit), cette technique permet
d’analyser des molécules natives pures ou en mélange.
Ionisation par électrospray
Le principe de l’électrospray (ES) repose sur la création d’un brouillard
électriquement chargé à partir d’un flux continu de liquide dans une enceinte à pression
atmosphérique. Une solution d’échantillon est introduite dans un capillaire dont une extrémité
est soumise à un fort champ électrique. Ce champ électrique intense provoque la formation
d’un nuage de gouttelettes chargées qui traversent simultanément un gradient de champ
électrique et de pression dans la direction de l’analyseur du spectromètre de masse. Le
brouillard résultant est entraîné par un gaz vecteur qui élimine progressivement le solvant des
gouttelettes. La diminution du rayon des gouttelettes augmente leur densité de charge
électrique et induit une désorption des ions dans la phase gazeuse. Les mesures de masse sont
ensuite effectuées au travers du rapport m/z. Ainsi, dans le cas d’une molécule possédant
plusieurs sites ionisables ou polaires, les ions formés sont multichargés et la gamme de
masses accessibles est grande sur un instrument donné. Comme pour le MALDI,
61