Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...
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Figure 43 : Principe du MALDI (d'après Karas <strong>et</strong> al., 152 )<br />
Les complexes chargés ainsi formés sont accélérés <strong>et</strong> envoyés dans un tube <strong>de</strong> vol jusqu’au<br />
détecteur. En général, la source MALDI est utilisée avec un analyseur à temps <strong>de</strong> vol (Time<br />
Of Flight). Celui-ci est proportionnel à la racine carrée <strong>de</strong>s rapports m/z. Outre sa gran<strong>de</strong><br />
sensibilité (0,01 % à partir <strong>de</strong> moins d’un picomole <strong>de</strong> produit), c<strong>et</strong>te technique perm<strong>et</strong><br />
d’analyser <strong>de</strong>s molécules natives pures ou en mélange.<br />
Ionisation par électrospray<br />
Le principe <strong>de</strong> l’électrospray (ES) repose sur la création d’un brouillard<br />
électriquement chargé à partir d’un flux continu <strong>de</strong> liqui<strong>de</strong> dans une enceinte à pression<br />
atmosphérique. Une solution d’échantillon est introduite dans un capillaire dont une extrémité<br />
est soumise à un fort champ électrique. Ce champ électrique intense provoque la formation<br />
d’un nuage <strong>de</strong> gouttel<strong>et</strong>tes chargées qui traversent simultanément un gradient <strong>de</strong> champ<br />
électrique <strong>et</strong> <strong>de</strong> pression dans la direction <strong>de</strong> l’analyseur du spectromètre <strong>de</strong> masse. Le<br />
brouillard résultant est entraîné par un gaz vecteur qui élimine progressivement le solvant <strong>de</strong>s<br />
gouttel<strong>et</strong>tes. La diminution du rayon <strong>de</strong>s gouttel<strong>et</strong>tes augmente leur <strong>de</strong>nsité <strong>de</strong> charge<br />
électrique <strong>et</strong> induit une désorption <strong>de</strong>s ions dans la phase gazeuse. Les mesures <strong>de</strong> masse sont<br />
ensuite effectuées au travers du rapport m/z. Ainsi, dans le cas d’une molécule possédant<br />
plusieurs sites ionisables ou polaires, les ions formés sont multichargés <strong>et</strong> la gamme <strong>de</strong><br />
masses accessibles est gran<strong>de</strong> sur un instrument donné. Comme pour le MALDI,<br />
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