Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...

Ionisation par MALDI
Le MALDI (Matrix-Assisted Laser Desorption-Ionisation) est une méthode
d’ionisation introduite par Karas et Hillenkamp en 1988. 152 Permettant d’analyser des
molécules de masse moléculaire supérieures à 300 kDa, elle est particulièrement adaptée à
l'études des N- ou O-glycanes. Actuellement, le mécanisme exact du MALDI n’est pas décrit
avec précision. Un échantillon solide est cocristallisé avec une matrice puis irradié par des
photons émis par un laser dont la longueur d’onde est située dans la bande d’absorption de la
matrice. Les matrices sont des chromophores à faible enthalpie de sublimation devant
absorber l’énergie du laser tout en favorisant l’ionisation par transferts de protons et assurant
une bonne séparation des molécules en réduisant les forces intermoléculaires. Les matrices les
plus utilisées sont les dérivés des acides cinnamiques et benzoïques.
Le choix de la matrice est important puisqu’il permet de jouer d'une part sur la
production des ions et, d’autre part, sur la résolution du spectre dans des gammes où on
observe un bruit de fond important dû à la matrice. L'acide 2,5-dihydroxybenzoïque est
particulièrement adapté à l'étude des oligosaccharides puisqu'il permet de minimiser la
dégradation de l'échantillon provoquée par l'absorption de l'énergie du faisceau laser incident.
L’énergie transmise par le laser est absorbée par la matrice et cet apport d’énergie provoque
son expansion en phase gazeuse en entraînant les molécules d’échantillon à analyser (Figure
43). L’échantillon est alors ionisé majoritairement par transfert de protons, soit avant
désorption dans la phase solide, soit par collision après désorption avec la matrice excitée ou
avec d’autres molécules du plasma tels que les sels de sodium. Les ions sodium favorisent
l’ionisation des polymères par complexation.
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