Extraction, caractérisation chimique et valorisation biologique de ...

1
CH3COOH -O
O
P
O
O
O
P
O
O
O
P
O
O
N
N
O
NH2 N
N
O
O
O
P
O
P
O
O
O
N
H2 C N
O
O OH
O P O
N
N
OH OH
CH2 O
H3C HO
H
CH3 O N + +
ACS
Acétyl-CoA + HO
O
P
O
O
N
N
O
NH2 N
N
+
4-
P2O7 ATP
OH OH
H
O
N
H
SH
AMP
COO-
2 Acétyl-CoA +
O CH2 COO-
+
Oxaloacetate
CS
HO
COO-
CH 2
COO-
CH2 COO-
Citrate
N
L-Malate
NH2 +
O
NH2 O P
O
O
O
L-MDH
O P O
Oxaloacetate NADH H
O OH OH
+
3 +
+ +
N
CH2 N
O
OH OH
NAD+
H 2 O
O
N
N
CoA
Figure 35 : Principe du dosage enzymatique des acétyles
50
+
Le nombre de moles d’acide acétique est enfin calculé selon les indications proposées
par la société Boehringer (Annexe 2).
Enfin, la spectrométrie de masse MALDI-MS est un bon outil pour estimer la
distribution des acétyles le long de la chaîne principale. 118 Gonçalves et al., 141 ont ainsi pu
démontrer que la distribution des acétyles sur les résidus xylose était très aléatoire. De plus
dans les régions où il n’y a pas de groupes acide 4-O-méthylglucuronique, le degré de
substitution en acétyle est inférieur à la moyenne.
I.3.2. Analyse structurale des oligosaccharides
L’analyse structurale d’un polysaccharide requiert l’obtention d’unités
oligosaccharidiques plus faciles à caractériser par les techniques de RMN et de spectrométrie
de masse. Cependant, dans le cas des polysaccharides contenant des acides uroniques, la
stabilité de la liaison uronosidyle rend souvent délicate l’application des méthodes
classiquement utilisées en glycochimie. Les liaisons engageant un ou plusieurs acides
hexuroniques peuvent en revanche constituer une zone de rupture privilégiée. Cette propriété
est souvent mise à profit pour le développement de méthodes spécifiques applicables aux
polysaccharides natifs contenant des acides uroniques.
CoA
NH 2